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- Tissue
- Col de l'utérus
- Disease
- Carcinome
- Metastatic site
- Col de l'utérus
- Synonyms
- Ca-Ski, Ca Ski, Caski, CASKI
Documents
Cellules CaSki
Cell line · Product number 300145
CaSki is a cell line exhibiting epithelial morphology, isolated from the cervix of a 40-year-old White female patient with epidermoid carcinoma. The estab...
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01General information
- Description
CaSki est une lignée cellulaire présentant une morphologie épithéliale, isolée du col de l’utérus d’une patiente de race blanche âgée de 40 ans atteinte d’un carcinome épidermoïde. La mise au point de cette lignée cellulaire constitue un modèle essentiel pour l’étude du cancer du col de l’utérus, en particulier dans le contexte de l’oncogenèse médiée par le VPH. Les cellules CaSki se caractérisent par leur capacité à répliquer l’ADN du VPH16, qui est intégré au génome de l’hôte, ce qui permet de mieux comprendre le cycle de vie du virus et son rôle dans la transformation maligne.
Ces cellules constituent une ressource essentielle dans la recherche sur le cancer, en particulier pour les études portant sur la pathogenèse du cancer du col de l’utérus associé au VPH. La présence du VPH16 à haut risque dans les cellules CaSki facilite l’exploration des fonctions des oncogènes viraux, notamment des protéines E6 et E7, ainsi que de leurs interactions avec les voies cellulaires de suppression tumorale, y compris celles impliquant les protéines p53 et pRB. Cet aspect rend les cellules CaSki inestimables pour l’évaluation de cibles thérapeutiques potentielles et le développement d’interventions visant les tumeurs malignes induites par le VPH.
- Tissue
- Col de l'utérus
- Disease
- Carcinome
- Metastatic site
- Col de l'utérus
- Synonyms
- Ca-Ski
- Ca Ski
- Caski
- CASKI
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- De type épithélial
- Cell type
- Épidermoïde
04Identifiers
- Citation
- CaSki (numéro de catalogue Cytion 300145)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1100
05Expression and susceptibility
- Isoenzymes
- G6PD, B
- Products
- Sous-unité bêta de l'hCG, antigène associé à la tumeur
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, contenant 2,0 mM de glutamine stable et 2,0 g/L de NaHCO₃ (numéro d'article Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.
- Supplements
- Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
- Seeding density
- Une densité de 1 × 10⁴ cellules/cm² permettra d'obtenir une monocouche confluente en 3 à 4 jours.
- Fluid renewal
- 2 à 3 fois par semaine
- Post-thaw recovery
- Après décongélation, ensemencer les cellules à une densité de 5 × 10⁴ cellules/cm² et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 48 heures.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.
Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.
- Freeze medium
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
- Storage conditions
Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.
- Shipping conditions
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
08Donor
- Donor age
- 40 ans
- Ethnicity
- caucasien
09Legal and safety
- Safety precautions
- Lorsqu’on prévoit entreposer un cryotube dans de l’azote liquide en vue d’une décongélation ultérieure, il est impératif de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Le port de gants et de vêtements de protection appropriés est essentiel, et l’utilisation d’un masque facial ou de lunettes de protection est obligatoire lors du transfert d’échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d’azote liquide. Cette précaution vise à réduire le risque de blessure causé par d’éventuelles explosions de cryotubes lors de leur retrait, pouvant entraîner la projection de fragments coupants.
- Warranty
Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.
Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.
- Material Transfer Agreement required
- Yes