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CaSki-Zellen
Gewebe
Gebärmutterhals
Krankheit
Karzinom
Metastasenherd
Gebärmutterhals
Synonyme
Ca-Ski, Ca Ski, Caski, CASKI

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CaSki-Zellen

Cell line · Artikelnummer 300145

CaSki ist eine Zelllinie mit epithelialer Morphologie, die aus dem Gebärmutterhals einer 40-jährigen weißen Patientin mit einem epidermoiden Karzinom isoliert wurde. Die Etablierung...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

CaSki ist eine Zelllinie mit epithelialer Morphologie, die aus dem Gebärmutterhals einer 40-jährigen weißen Patientin mit Epidermoidkarzinom isoliert wurde. Die Etablierung dieser Zelllinie stellt ein wichtiges Modell für die Untersuchung von Gebärmutterhalskrebs dar, insbesondere im Zusammenhang mit der HPV-vermittelten Onkogenese. CaSki-Zellen zeichnen sich durch ihre Fähigkeit aus, HPV16-DNA zu replizieren, die in das Genom des Wirts integriert wird, was Einblicke in den viralen Lebenszyklus und seine Rolle bei der malignen Transformation ermöglicht.

Diese Zellen sind eine wichtige Ressource in der Krebsforschung, insbesondere für Studien, die sich mit der Pathogenese von HPV-assoziiertem Gebärmutterhalskrebs befassen. Das Vorhandensein von Hochrisiko-HPV16 in CaSki-Zellen erleichtert die Erforschung der Funktionen des viralen Onkogens, insbesondere der E6- und E7-Proteine und ihrer Interaktionen mit zellulären Tumorsuppressorwegen, einschließlich derjenigen, an denen p53 und pRB beteiligt sind. Dieser Aspekt macht CaSki-Zellen zu einem unschätzbaren Wert für die Bewertung potenzieller therapeutischer Ziele und die Entwicklung von Maßnahmen gegen HPV-induzierte bösartige Erkrankungen.

Gewebe
Gebärmutterhals
Krankheit
Karzinom
Metastasenherd
Gebärmutterhals
Synonyme
  • Ca-Ski
  • Ca Ski
  • Caski
  • CASKI

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
2

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Zelltyp
Epidermoid

04Bezeichner

Quellenangabe
CaSki (Cytion Katalognummer 300145)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1100

05Expression und Anfälligkeit

Isoenzyme
G6PD, B
Produkte
Beta-Untereinheit von hCG, tumorassoziiertes Antigen

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
1 x 104 Zellen/cm² führen innerhalb von 3 bis 4 Tagen zu einer konfluenten Monoschicht.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 5 x 104 Zellen/cm² ausplattieren und die Zellen mindestens 48 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen und anhaften lassen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
40 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch