Ga naar de inhoud
CaSki cellen
Weefsel
Baarmoederhals
Ziekte
Carcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Baarmoederhals
Synoniemen
Ca-Ski, Ca Ski, Caski, CASKI

Documenten

CaSki cellen

Cell line · Productnummer 300145

CaSki is een cellijn met een epitheliale morfologie, geïsoleerd uit de baarmoederhals van een 40-jarige blanke vrouwelijke patiënte met een epidermoïd carcinoom. De oprichting...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

CaSki is een cellijn met epitheliale morfologie, geïsoleerd uit de baarmoederhals van een 40-jarige blanke vrouwelijke patiënt met epidermoïd carcinoom. De oprichting van deze cellijn biedt een cruciaal model voor de studie van baarmoederhalskanker, met name in de context van HPV-gemedieerde oncogenese. CaSki-cellen worden gekenmerkt door hun vermogen om HPV16-DNA te repliceren, dat wordt geïntegreerd in het genoom van de gastheer, waardoor inzicht wordt verkregen in de virale levenscyclus en de rol ervan in kwaadaardige transformatie.

Deze cellen zijn een essentiële bron in kankeronderzoek, vooral voor studies die zich richten op de pathogenese van HPV-geassocieerde baarmoederhalskanker. De aanwezigheid van hoog-risico HPV16 in CaSki-cellen vergemakkelijkt het onderzoek naar virale oncogene functies, met name de E6- en E7-eiwitten en hun interacties met cellulaire tumorsuppressorpaden, waaronder die waarbij p53 en pRB betrokken zijn. Dit aspect maakt CaSki-cellen van onschatbare waarde voor het evalueren van potentiële therapeutische doelen en het ontwikkelen van interventies gericht op HPV-geïnduceerde maligniteiten.

Weefsel
Baarmoederhals
Ziekte
Carcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Baarmoederhals
Synoniemen
  • Ca-Ski
  • Ca Ski
  • Caski
  • CASKI

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
2

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Celtype
Epidermoïd

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
CaSki (Cytion catalogusnummer 300145)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1100

05Expressie en vatbaarheid

Iso-enzymen
G6PD, B
Producten
Beta-subeenheid van hCG, tumorgeassocieerd antigeen

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1 x 104 cellen/cm2 resulteert binnen 3 tot 4 dagen in een confluente monolaag.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, zaai de cellen uit op 5 x 104 cellen/cm2 en laat de cellen minstens 48 uur herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
40 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch