Przejdź do treści
Komórki CaSki
Chusteczka
Szyjka macicy
Choroba
Rak
Miejsce przerzutów
Szyjka macicy
Synonimy
Ca-Ski, Ca Ski, Caski, CASKI

Dokumenty

Komórki CaSki

Cell line · Numer produktu 300145

CaSki to linia komórkowa o morfologii nabłonkowej, wyizolowana z szyjki macicy 40-letniej pacjentki rasy białej cierpiącej na raka naskórkowego. Utworzenie...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

CaSki to linia komórkowa wykazująca morfologię nabłonkową, wyizolowana z szyjki macicy 40-letniej białej pacjentki z rakiem naskórka. Ustanowienie tej linii komórkowej zapewnia krytyczny model do badania raka szyjki macicy, szczególnie w kontekście onkogenezy, w której pośredniczy HPV. Komórki CaSki charakteryzują się zdolnością do replikacji DNA HPV16, które jest zintegrowane z genomem gospodarza, oferując wgląd w cykl życia wirusa i jego rolę w transformacji nowotworowej.

Komórki te są niezbędnym zasobem w badaniach nad rakiem, szczególnie w badaniach skupiających się na patogenezie raka szyjki macicy związanego z HPV. Obecność wirusa HPV16 wysokiego ryzyka w komórkach CaSki ułatwia badanie funkcji onkogenów wirusowych, w szczególności białek E6 i E7 oraz ich interakcji z komórkowymi szlakami supresorowymi nowotworów, w tym tymi obejmującymi p53 i pRB. Ten aspekt sprawia, że komórki CaSki są nieocenione w ocenie potencjalnych celów terapeutycznych i opracowywaniu interwencji ukierunkowanych na nowotwory złośliwe wywołane przez HPV.

Chusteczka
Szyjka macicy
Choroba
Rak
Miejsce przerzutów
Szyjka macicy
Synonimy
  • Ca-Ski
  • Ca Ski
  • Caski
  • CASKI

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
2

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Typ komórki
Epidermoid

04Identyfikatory

Źródło
CaSki (numer katalogowy Cytion 300145)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1100

05Ekspresja i podatność

Izoenzymy
G6PD, B
Produkty
Podjednostka beta hCG, antygen związany z nowotworem

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 x 104 komórek/cm2 spowoduje powstanie zlewającej się monowarstwy w ciągu 3 do 4 dni.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 48 godzin, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
40 lat
Pochodzenie etniczne
Kaukaski