Skip to content
เซลล์ CaSki
Tissue
ปากมดลูก
Disease
มะเร็งชนิดคาร์ซินอมา
Metastatic site
ปากมดลูก
Synonyms
Ca-Ski, Ca Ski, Caski, CASKI

Documents

เซลล์ CaSki

Cell line · Product number 300145

CaSki is a cell line exhibiting epithelial morphology, isolated from the cervix of a 40-year-old White female patient with epidermoid carcinoma. The estab...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

CaSki เป็นสายเซลล์ที่มีลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเซลล์เยื่อบุผิว แยกได้จากปากมดลูกของผู้ป่วยหญิงผิวขาวอายุ 40 ปีที่เป็นมะเร็งผิวหนังชนิดเอพิเดอร์โมอิดการก่อตั้งเซลล์ไลน์นี้มอบแบบจำลองที่สำคัญสำหรับการศึกษาโรคมะเร็งปากมดลูก โดยเฉพาะอย่างยิ่งในบริบทของการเกิดมะเร็งที่เกิดจากเชื้อ HPV เซลล์ CaSki มีลักษณะเด่นคือความสามารถในการจำลอง DNA ของเชื้อ HPV16 ซึ่งถูกผสานเข้ากับจีโนมของโฮสต์ ซึ่งช่วยให้เข้าใจวงจรชีวิตของไวรัสและบทบาทของมันในการเปลี่ยนแปลงเป็นมะเร็ง

เซลล์เหล่านี้เป็นทรัพยากรที่สำคัญในการวิจัยโรคมะเร็ง โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับการศึกษาที่มุ่งเน้นไปที่การเกิดโรคของมะเร็งปากมดลูกที่เกี่ยวข้องกับ HPV การมีอยู่ของ HPV16 ความเสี่ยงสูงในเซลล์ CaSki ช่วยอำนวยความสะดวกในการสำรวจหน้าที่ของยีนก่อมะเร็งของไวรัส โดยเฉพาะอย่างยิ่งโปรตีน E6 และ E7 และการมีปฏิสัมพันธ์กับเส้นทางยับยั้งการเกิดเนื้องอกของเซลล์ รวมถึงเส้นทางที่เกี่ยวข้องกับ p53 และ pRB แง่มุมนี้ทำให้เซลล์ CaSki มีคุณค่าอย่างยิ่งสำหรับการประเมินเป้าหมายการรักษาที่เป็นไปได้และการพัฒนาวิธีการแทรกแซงที่มุ่งเป้าไปที่มะเร็งที่เกิดจาก HPV

Tissue
ปากมดลูก
Disease
มะเร็งชนิดคาร์ซินอมา
Metastatic site
ปากมดลูก
Synonyms
  • Ca-Ski
  • Ca Ski
  • Caski
  • CASKI

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Cell type
เอพิเดอร์โมอิด

04Identifiers

Citation
CaSki (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300145)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1100

05Expression and susceptibility

Isoenzymes
จี6พีดี, บี
Products
หน่วยย่อยเบต้าของ hCG, แอนติเจนที่เกี่ยวข้องกับเนื้องอก

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1 x 104 เซลล์/cm2 จะทำให้เกิดชั้นเดียวที่หนาแน่นภายใน 3 ถึง 4 วัน
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเลี้ยงเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์/ซม. และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 48 ชั่วโมง
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
40 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน