Siirry sisältöön
CaSki-solut
Kudos
Kohdunkaula
Sairaus
Syöpä
Metastaasikohde
Kohdunkaula
Synonyymit
Ca-Ski, Ca Ski, Caski, CASKI

Asiakirjat

CaSki-solut

Cell line · Tuotenumero 300145

CaSki on epiteelimorfologiaa osoittava solulinja, joka on eristetty 40-vuotiaan valkoihoisen naispotilaan kohdunkaulasta; potilaalla oli epidermoidikarsinooma. Solulinjan perustaminen...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

CaSki on solulinja, jolla on epiteelimorfologia ja joka on eristetty 40-vuotiaan valkoihoisen naispotilaan kohdunkaulasta, jolla on epidermoidikarsinooma. Tämän solulinjan perustaminen tarjoaa kriittisen mallin kohdunkaulan syövän tutkimiseen, erityisesti HPV-välitteisen onkogeneesin yhteydessä. CaSki-soluille on ominaista niiden kyky replikoida HPV16-dna:ta, joka integroituu isännän genomiin, mikä tarjoaa tietoa viruksen elinkaaresta ja sen roolista pahanlaatuisessa transformaatiossa.

Nämä solut ovat olennainen resurssi syöpätutkimuksessa, erityisesti tutkimuksissa, joissa keskitytään HPV:n aiheuttaman kohdunkaulan syövän patogeneesiin. Korkean riskin HPV16:n esiintyminen CaSki-soluissa helpottaa viruksen onkogeenien, erityisesti E6- ja E7-proteiinien, toimintojen ja niiden vuorovaikutuksen tutkimista solun kasvainsuppressorireittien kanssa, mukaan lukien p53- ja pRB-proteiinit. Tämä tekee CaSki-soluista korvaamattoman arvokkaita arvioitaessa mahdollisia terapeuttisia kohteita ja kehitettäessä HPV:n aiheuttamiin pahanlaatuisiin kasvaimiin kohdistuvia toimenpiteitä.

Kudos
Kohdunkaula
Sairaus
Syöpä
Metastaasikohde
Kohdunkaula
Synonyymit
  • Ca-Ski
  • Ca Ski
  • Caski
  • CASKI

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
2

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Solutyyppi
Epidermoidi

04Tunnisteet

Lähdeviite
CaSki (Cytionin luettelonumero 300145)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1100

05Ilmentyminen ja alttius

Isoentsyymit
G6PD, B
Tuotteet
HCG:n beeta-alayksikkö, kasvaimeen liittyvä antigeeni

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1 x 104 solua/cm2 tuottaa yhtenäisen yksikerroksen 3–4 päivän kuluessa.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua jäädyttämisprosessista ja kiinnittyä vähintään 48 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
40 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen