Mine otse sisu juurde
CaSki rakud
Kude
Emakakael
Haigus
Kartsinoom
Metastaaside asukoht
Emakakael
Sünonüümid
Ca-Ski, Ca Ski, Caski, CASKI

Dokumendid

CaSki rakud

Cell line · Toote number 300145

CaSki on epiteelimorfoloogiat ilmutav rakuliin, mis on isoleeritud 40-aastase valgenahalise naispatsiendi emakakaelast, kellel diagnoositi epidermoidkartsinoom. Selle rajamine...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

CaSki on epiteliaalse morfoloogiaga rakuliin, mis on isoleeritud 40-aastase valge naisterahva epidermoidkartsinoomiga emakakaelast. Selle rakuliini loomine annab kriitilise mudeli emakakaelavähi uurimiseks, eriti HPV-vahendatud onkogeneesi kontekstis. CaSki rakke iseloomustab nende võime paljundada HPV16 DNA-d, mis integreerub peremehe genoomi, andes ülevaate viiruse elutsüklist ja selle rollist pahaloomulises transformatsioonis.

Need rakud on oluline ressurss vähiuuringutes, eriti HPV-ga seotud emakakaelavähi patogeneesile keskenduvates uuringutes. Kõrge riskiga HPV16 esinemine CaSki rakkudes hõlbustab viirusliku onkogeeni funktsioonide, eelkõige E6 ja E7 valkude ja nende koostoimete uurimist raku kasvajasupressorite, sealhulgas p53 ja pRB rakkude vahel. See aspekt muudab CaSki rakud hindamatuks võimalike terapeutiliste sihtmärkide hindamisel ja HPV põhjustatud pahaloomuliste haiguste vastu suunatud sekkumiste väljatöötamisel.

Kude
Emakakael
Haigus
Kartsinoom
Metastaaside asukoht
Emakakael
Sünonüümid
  • Ca-Ski
  • Ca Ski
  • Caski
  • CASKI

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
2

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Rakutüüp
Epidermoid

04Tunnused

Viide
CaSki (Cytioni katalooginumber 300145)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1100

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Isoensüümid
G6PD, B
Tooted
HCG beeta-alaühik, kasvajaga seotud antigeen

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2 annab 3–4 päeva jooksul tulemuseks konfluentse monokihi.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 48 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
40 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia