Pāriet uz saturu
CaSki šūnas
Audums
Dzemdes kakls
Slimība
Karcinoma
Metastāžu vieta
Dzemdes kakls
Sinonīmi
Ca-Ski, Ca Ski, Caski, CASKI

Dokumenti

CaSki šūnas

Cell line · Preces numurs 300145

CaSki ir šūnu līnija ar epitēlija morfoloģiju, kas izdalīta no 40 gadus vecas baltās sievietes dzemdes kakla, kurai bija epidermoīda karcinoma. Izveidošana...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

CaSki ir šūnu līnija ar epitēlija morfoloģiju, kas izolēta no dzemdes kakla no 40 gadus vecas baltās sievietes, kurai bija epidermoīdā karcinoma. Šīs šūnu līnijas izveide nodrošina būtisku modeli dzemdes kakla vēža izpētei, jo īpaši saistībā ar HPV mediēto onkoģenēzi. CaSki šūnām raksturīga spēja replicēt HPV16 DNS, kas tiek integrēta saimnieka genomā, sniedzot ieskatu vīrusa dzīves ciklā un tā lomā ļaundabīgā pārveidē.

Šīs šūnas ir būtisks resurss vēža pētniecībā, jo īpaši pētījumos, kas vērsti uz dzemdes kakla kakla vēža, kas saistīts ar HPV, patoģenēzi. Augsta riska HPV16 klātbūtne CaSki šūnās atvieglo vīrusa onkogēna funkciju izpēti, jo īpaši E6 un E7 proteīnu un to mijiedarbības ar šūnu audzēja supresoru ceļiem, tostarp ar p53 un pRB. Šis aspekts padara CaSki šūnas nenovērtējamas, lai novērtētu potenciālos terapeitiskos mērķus un izstrādātu pasākumus, kas vērsti uz HPV izraisītu ļaundabīgu audzēju apkarošanu.

Audums
Dzemdes kakls
Slimība
Karcinoma
Metastāžu vieta
Dzemdes kakls
Sinonīmi
  • Ca-Ski
  • Ca Ski
  • Caski
  • CASKI

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
2

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Šūnu tips
Epidermoīdā

04Identifikatori

Atsauce
CaSki (Cytion kataloga numurs 300145)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1100

05Pazīmes un uzņēmība

Izoenzīmi
G6PD, B
Produkti
HCG beta apakšvienība, ar audzēju saistīts antigēns

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2 izveidos konfluentu monoslāni 3 līdz 4 dienu laikā.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 48 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
40 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis