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Cellule CaSki
Tessuto
Cervice
Malattia
Carcinoma
Sito metastatico
Cervice
Sinonimi
Ca-Ski, Ca Ski, Caski, CASKI

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Cellule CaSki

Cell line · Codice prodotto 300145

CaSki è una linea cellulare che presenta una morfologia epiteliale, isolata dalla cervice di una paziente bianca di 40 anni affetta da carcinoma epidermoide. La creazione...

€430.00IVA e spese di spedizione escluse

Personalizzazione / Suggerimenti

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01Informazioni generali

Descrizione

CaSki è una linea cellulare con morfologia epiteliale, isolata dalla cervice di una paziente bianca di 40 anni affetta da carcinoma epidermoide. L'istituzione di questa linea cellulare fornisce un modello critico per lo studio del cancro cervicale, in particolare nel contesto dell'oncogenesi mediata da HPV. Le cellule CaSki sono caratterizzate dalla capacità di replicare il DNA di HPV16, che si integra nel genoma dell'ospite, offrendo spunti di riflessione sul ciclo di vita virale e sul suo ruolo nella trasformazione maligna.

Queste cellule sono una risorsa essenziale per la ricerca sul cancro, in particolare per gli studi sulla patogenesi del cancro cervicale associato all'HPV. La presenza di HPV16 ad alto rischio nelle cellule CaSki facilita l'esplorazione delle funzioni dell'oncogene virale, in particolare delle proteine E6 ed E7 e delle loro interazioni con le vie cellulari di soppressione tumorale, comprese quelle che coinvolgono p53 e prB. Questo aspetto rende le cellule CaSki preziose per la valutazione di potenziali bersagli terapeutici e lo sviluppo di interventi mirati alle neoplasie indotte da HPV.

Tessuto
Cervice
Malattia
Carcinoma
Sito metastatico
Cervice
Sinonimi
  • Ca-Ski
  • Ca Ski
  • Caski
  • CASKI

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
2

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tipo di cellula
Epidermoide

04Identificatori

Riferimento bibliografico
CaSki (numero di catalogo Cytion 300145)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1100

05Espressione e suscettibilità

Isoenzimi
G6PD, B
Prodotti
Subunità beta di hCG, antigene associato al tumore

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
1 x 104 cellule/cm2 darà origine a un monostrato confluente entro 3-4 giorni.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 48 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
40 anni
Etnia
Caucasico