NCI-H889

La lignée cellulaire NCI-H889 est une lignée de cellules de cancer du poumon à petites cellules (CPPC) humain présentant des caractéristiques neuroendocrines. Elle a été établie à partir d’un patient adulte et est classée comme un modèle classique de CPPC selon des critères morphologiques et moléculaires. Les cellules se développent en suspension et présentent la morphologie ronde à ovale typique du CPPC. La lignée NCI-H889 exprime plusieurs marqueurs neuroendocriniens et a été largement utilisée dans des études mécanistiques et pharmacologiques liées à ce sous-type agressif de cancer du poumon.

Sur le plan fonctionnel, la lignée NCI-H889 se caractérise par une signalisation autocrine via le facteur de croissance analogue à l’insuline II (IGF-II) et son récepteur IGF-R. Bien que l’ARNm de l’IGF-I soit largement détecté parmi les lignées cellulaires de cancer du poumon, la sécrétion directe de la protéine IGF-I est rare; dans la lignée NCI-H889, le ligand prédominant impliqué dans la stimulation de la croissance est l’IGF-II. Ce constat concorde avec les résultats qui confirment que les boucles de signalisation IGF-II/IGF-R constituent des moteurs clés de la croissance autocrine dans les lignées cellulaires de CPPC. Ces interactions autocrines font de la lignée NCI-H889 un système précieux pour l’étude de la signalisation mitogène médiée par l’IGF et de son inhibition thérapeutique.

Les analyses épigénétiques de la lignée NCI-H889 ont également permis de mieux comprendre la régulation de la réponse aux médicaments. Le profil de méthylation révèle des altérations dans plusieurs gènes impliqués dans la réponse aux dommages à l’ADN, la régulation du cycle cellulaire et le contrôle transcriptionnel. Par exemple, la lignée NCI-H889 a été incluse dans des études démontrant une méthylation et une expression différentielles de gènes tels que SLFN11, qui est associé à la sensibilité aux agents endommageant l’ADN, et EZH2, une méthyltransférase d’histones fréquemment surexprimée dans le CPPC. L’ensemble de ces caractéristiques fait de la lignée NCI-H889 un modèle préclinique pertinent pour l’étude des vulnérabilités thérapeutiques associées aux tumeurs pulmonaires neuroendocrines.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.