NCI-H889

A NCI-H889 é uma linhagem celular de câncer de pulmão de pequenas células (SCLC) humano com características neuroendócrinas. Foi estabelecida a partir de um paciente adulto e é classificada como um modelo clássico de SCLC com base em critérios morfológicos e moleculares. As células crescem em suspensão e apresentam a morfologia redonda a oval típica do SCLC. A NCI-H889 expressa vários marcadores neuroendócrinos e tem sido amplamente utilizada em estudos mecanísticos e farmacológicos relacionados a esse subtipo agressivo de câncer de pulmão.

Funcionalmente, a NCI-H889 é caracterizada pela sinalização autócrina por meio do fator de crescimento semelhante à insulina II (IGF-II) e seu receptor IGF-R. Embora o mRNA do IGF-I seja amplamente detectado entre as linhagens celulares de câncer de pulmão, a secreção direta da proteína IGF-I é rara; na NCI-H889, o ligante predominante envolvido na estimulação do crescimento é o IGF-II. Isso é consistente com descobertas que apoiam os ciclos de sinalização IGF-II/IGF-R como principais impulsionadores do crescimento autócrino em linhagens celulares de SCLC. Essas interações autócrinas tornam a NCI-H889 um sistema valioso para o estudo da sinalização mitogênica mediada pelo IGF e sua interrupção terapêutica.

Análises epigenéticas da linha NCI-H889 também forneceram insights sobre a regulação da resposta a medicamentos. O perfil de metilação indica alterações em vários genes envolvidos na resposta a danos no DNA, na regulação do ciclo celular e no controle transcricional. Por exemplo, a linha NCI-H889 foi incluída em estudos que demonstraram metilação e expressão diferenciais de genes como o SLFN11 — associado à sensibilidade a agentes que causam danos ao DNA — e o EZH2, uma metiltransferase de histonas frequentemente regulada positivamente no SCLC. Essas características, em conjunto, posicionam a linha celular NCI-H889 como um modelo pré-clínico relevante para explorar vulnerabilidades terapêuticas associadas a tumores pulmonares neuroendócrinos.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.