NCI-H889

NCI-H889 to ludzka linia komórkowa drobnokomórkowego raka płuca (SCLC) o cechach neuroendokrynnych. Została ona wyhodowana z komórek dorosłego pacjenta i na podstawie kryteriów morfologicznych i molekularnych została sklasyfikowana jako klasyczny model SCLC. Komórki rosną w zawiesinie i wykazują typową dla SCLC morfologię od okrągłej do owalnej. NCI-H889 wykazuje ekspresję kilku markerów neuroendokrynnych i jest szeroko stosowana w badaniach mechanistycznych i farmakologicznych związanych z tym agresywnym podtypem raka płuca.

Pod względem funkcjonalnym NCI-H889 charakteryzuje się sygnalizacją autokrynną poprzez insulinopodobny czynnik wzrostu II (IGF-II) i jego receptor IGF-R. Chociaż mRNA IGF-I jest powszechnie wykrywane wśród linii komórkowych raka płuca, bezpośrednie wydzielanie białka IGF-I jest rzadkie; w NCI-H889 dominującym ligandem zaangażowanym w stymulację wzrostu jest IGF-II. Jest to zgodne z wynikami badań potwierdzającymi, że pętle sygnałowe IGF-II/IGF-R są kluczowymi czynnikami stymulującymi autokrynny wzrost w liniach komórkowych SCLC. Te autokrynne interakcje sprawiają, że NCI-H889 jest cennym systemem do badania sygnalizacji mitogenicznej za pośrednictwem IGF i jej terapeutycznego zakłócania.

Analizy epigenetyczne NCI-H889 dostarczyły również informacji na temat regulacji odpowiedzi na leki. Profilowanie metylacji wskazuje na zmiany w kilku genach zaangażowanych w odpowiedź na uszkodzenia DNA, regulację cyklu komórkowego i kontrolę transkrypcji. Na przykład NCI-H889 został uwzględniony w badaniach wykazujących zróżnicowaną metylację i ekspresję genów, takich jak SLFN11, który jest związany z wrażliwością na czynniki uszkadzające DNA, oraz EZH2, metylotransferaza histonowa często regulowana w górę w SCLC. Cechy te łącznie pozycjonują NCI-H889 jako odpowiedni model przedkliniczny do badania wrażliwości terapeutycznej związanej z nowotworami neuroendokrynnymi płuc.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym