
- Tissue
- שד
- Disease
- אדנוקרצינומה
- Metastatic site
- הצטברות נוזלים בחלל הצדר
- Synonyms
- AU-565, AU 565
Documents
AU565
Cell line · Product number 305313
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
קו התאים AU565 נגזר מקרצינומה של השד האנושי ומסווג כ-HER2-חיובי, מה שהופך אותו למודל חשוב לחקר טיפולים המכוונים ל-HER2, כגון טראסטוזומאב (TZM). תאים אלה נמצאים בשימוש נרחב לחקר התנהגות סרטן השד, במיוחד בכל הקשור למתן תרופות מכוון ותהליכי גרורות. מחקרים שבוצעו בתאי AU565 הראו כי הם מפגינים ביטוי HER2 משמעותי בקרום הפלזמה, מה שמקל על מחקרים בנושא יעילות הקשירה והפנימה של נוגדנים מונוקלונליים נגד HER2, כגון TZM. תאי AU565 מציגים קישור TZM יעיל בקרום, עם הצטברות עוקבת בתאים, ומספקים תובנות על מנגנוני האנדוציטוזה וההעברה המעורבים בקליטת TZM ובשימורו בתאי הגידול. התנהגות ייחודית זו הופכת את AU565 למודל ייחודי בהשוואה לקווי תאים חיוביים ל-HER2 אחרים, ותומכת בשימוש בו לחקר יעילות התרופות ודינמיקת קרום התא.
תאי AU565 משמשים גם כמודל לחקר התנהגות גרורתית, ובפרט הגירה טרנסאנדותלית, המהווה שלב קריטי בגרורות סרטניות. כקו תאים פולשני חלש, יכולתו של AU565 להגר בין שכבות תאי האנדותל תלויה במידה רבה באיתות FAK (focal adhesion kinase), המקל על אינטראקציות עם המטריצה החוץ-תאית ותאי האנדותל במהלך ההגירה. הוכח כי עיכוב פעילות FAK בתאי AU565 מפחית את קצב הנדידה שלהם, מה שמדגיש את תפקידו של FAK בתנועתיות התאים ומרמז על הפוטנציאל שלו כיעד טיפולי להגבלת התקדמות גרורתית. בנוסף, תאי AU565 מגיבים לשינויים בסביבה המיקרו-סביבתית של הגידול, כגון הבדלים בצפיפות הקולגן, אשר עשויים להשפיע על יעילות מתן התרופה ועל העמידות לה. מאפיינים אלה הופכים את תאי AU565 למודל רב-עוצמה לחקר טיפולים המכוונים ל-HER2 והשפעות הסביבה המיקרו-סביבתית של הגידול על תוצאות הטיפול.
- Tissue
- שד
- Disease
- אדנוקרצינומה
- Metastatic site
- הצטברות נוזלים בחלל הצדר
- Synonyms
- AU-565
- AU 565
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
04Identifiers
- Citation
- AU565 (מספר קטלוגי Cytion 305313)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1074
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- פקטור גדילה אפידרמלי (EGF)
- Oncogenes
- Her2/neu+ (ביטוי יתר), her3+, her4+, p53+
- Mutational profile
- מוטציה: TP53, p.Arg175His (c.524G>A), הומוזיגוטי
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Fluid renewal
- 1 עד 2 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 43 שנים
- Ethnicity
- קווקזי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
10Product details
- Composition table