Pāriet uz saturu
AU565
Audums
Krūtis
Slimība
Adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums
Sinonīmi
AU-565, AU 565

Dokumenti

AU565

Cell line · Preces numurs 305313

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

AU565 šūnu līnija ir iegūta no cilvēka krūts karcinomas un ir klasificēta kā HER2 pozitīva, tāpēc tā ir vērtīgs modelis HER2 mērķētas terapijas, piemēram, trastuzumaba (TZM), pētījumiem. Šīs šūnas tiek plaši izmantotas, lai pētītu krūts vēža uzvedību, jo īpaši attiecībā uz mērķtiecīgu zāļu piegādi un metastāzes procesiem. Pētījumi, kuros izmantotas AU565 šūnas, ir parādījuši, ka tām piemīt ievērojama HER2 ekspresija plazmas membrānā, kas atvieglo pētījumus par anti HER2 monoklonālo antivielu, piemēram, TZM, saistīšanās efektivitāti un internalizāciju. AU565 šūnas uzrāda efektīvu TZM saistīšanos pie membrānas ar sekojošu uzkrāšanos intracelulārajos nodalījumos, sniedzot ieskatu endocītiskajos un transportēšanas mehānismos, kas saistīti ar TZM uzņemšanu un saglabāšanu audzēja šūnās. Šī unikālā uzvedība padara AU565 par atšķirīgu modeli salīdzinājumā ar citām HER2 pozitīvām šūnu līnijām un atbalsta tās izmantošanu zāļu efektivitātes un šūnu membrānu dinamikas pētniecībā.

AU565 šūnas kalpo arī kā modelis metastātiskas uzvedības izpētei, jo īpaši transendoteliālajai migrācijai, kas ir izšķirošs solis vēža metastāzēšanā. Tā kā AU565 ir vāji invazīva šūnu līnija, tās spēja migrēt pāri endotēlija šūnu slāņiem ir ļoti atkarīga no fokālās adhēzijas kināzes (FAK) signalizācijas, kas migrācijas laikā veicina mijiedarbību ar ekstracelulāro matriksu un endotēlija šūnām. Pierādīts, ka FAK aktivitātes inhibēšana AU565 šūnās samazina to migrācijas ātrumu, tādējādi uzsverot FAK lomu šūnu mobilitātē un norādot uz tās potenciālu kā terapeitisku mērķi metastātiskas progresijas ierobežošanai. Turklāt AU565 šūnas reaģē uz izmaiņām audzēja mikrovidē, piemēram, kolagēna blīvuma atšķirībām, kas var ietekmēt zāļu piegādes efektivitāti un rezistenci. Šīs īpašības padara AU565 šūnas par spēcīgu modeli, lai pētītu HER2 mērķētas terapijas un audzēja mikrovides ietekmi uz ārstēšanas rezultātiem.

Audums
Krūtis
Slimība
Adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums
Sinonīmi
  • AU-565
  • AU 565

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs

04Identifikatori

Atsauce
AU565 (Cytion kataloga numurs 305313)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1074

05Pazīmes un uzņēmība

Ekspresētie receptori
Epidermas augšanas faktors (EGF)
Onkogēni
Her2/neu+ (pārmērīga ekspresija), her3+, her4+, p53+
Mutāciju profils
Mutācija: TP53, p.Arg175His (c.524G>A), homozigotiska

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
1 līdz 2 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
43 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis

10Informācija par produktu

Sastāva tabula