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AU565
Tecido
Peito
Doença
Adenocarcinoma
Local da metástase
Derrame pleural
Sinónimos
AU-565, AU 565

Documentos

AU565

Cell line · Número do produto 305313

€430.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

Em stock
Lote
Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

A linha de células AU565 é derivada de um carcinoma da mama humano e é classificada como HER2-positiva, o que a torna um modelo valioso para o estudo de terapias direcionadas para o HER2, como o trastuzumab (TZM). Estas células são amplamente utilizadas para investigar o comportamento do cancro da mama, especialmente no que diz respeito à administração de medicamentos específicos e aos processos metastáticos. A investigação utilizando células AU565 mostrou que estas exibem uma expressão significativa de HER2 na membrana plasmática, facilitando estudos sobre a eficiência de ligação e internalização de anticorpos monoclonais anti-HER2 como o TZM. As células AU565 apresentam uma ligação eficiente da TZM à membrana, com subsequente acumulação em compartimentos intracelulares, o que permite compreender os mecanismos endocíticos e de tráfico envolvidos na captação e retenção da TZM nas células tumorais. Este comportamento único faz da AU565 um modelo distinto em comparação com outras linhas celulares HER2-positivas e apoia a sua utilização na exploração da eficácia dos medicamentos e da dinâmica da membrana celular.

As células AU565 também servem de modelo para estudar o comportamento metastático, especificamente a migração transendotelial, que é um passo crítico na metástase do cancro. Sendo uma linha celular fracamente invasiva, a capacidade da AU565 para migrar através das camadas de células endoteliais é altamente dependente da sinalização da quinase de adesão focal (FAK), que facilita as interações com a matriz extracelular e as células endoteliais durante a migração. A inibição da atividade da FAK nas células AU565 demonstrou reduzir as suas taxas de migração, realçando o papel da FAK na motilidade celular e sugerindo o seu potencial como alvo terapêutico para limitar a progressão metastática. Além disso, as células AU565 apresentam respostas a variações no microambiente tumoral, como diferenças na densidade do colagénio, que podem ter impacto na eficácia e resistência da administração de medicamentos. Estas caraterísticas fazem das células AU565 um modelo poderoso para o estudo de terapias direcionadas para o HER2 e das influências do microambiente tumoral nos resultados do tratamento.

Tecido
Peito
Doença
Adenocarcinoma
Local da metástase
Derrame pleural
Sinónimos
  • AU-565
  • AU 565

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial

04Identificadores

Referência
AU565 (número de catálogo Cytion 305313)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1074

05Expressão e suscetibilidade

Receptores expressos
Fator de crescimento epidérmico (EGF)
Oncogenes
Her2/neu+ (sobreexpressão), her3+, her4+, p53+
Perfil mutacional
Mutação: TP53, p.Arg175His (c.524G>A), homozigótico

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
1 a 2 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
43 anos
Etnia
Caucasiano

10Detalhes do produto

Tabela de composição