01General information
- Description
קו התאים HCC1954 נגזר מקרצינומה דוקטלית ראשונית של חולה בסרטן השד בבגרות. קו תאים זה נמצא בשימוש נרחב במחקר סרטן השד, במיוחד לחקר המאפיינים הגנטיים והמולקולריים של סוגי סרטן השד HER2-חיובי (HER2+) ושלוש-שלילי. תאי HCC1954 מבטאים יתר על המידה את HER2 ונושאים מוטציות בגן PIK3CA, מה שהופך אותם למודל חשוב לחקר מסלולי האיתות המעורבים בהתקדמות הסרטן ובפיתוח טיפולים ממוקדים.
תאי HCC1954 מציגים מורפולוגיה אפיתלית וידועים במאפייני הצמיחה האגרסיביים שלהם הן במבחנה והן in vivo. הם מבטאים סמנים הקשורים לפנוטיפים אגרסיביים של סרטן השד, כולל HER2/neu, אך אינם מבטאים קולטן אסטרוגן (ER) וקולטן פרוגסטרון (PR), מה שמסווג אותם כתאי סרטן שד שליליים משולשים. קו תאים זה נמצא בשימוש נרחב להערכת היעילות ומנגנוני הפעולה של טיפולים ממוקדים ב-HER2, כגון טראסטוזומאב, וכן מעכבי PI3K חדשים. בנוסף, תאי HCC1954 משמשים במחקרים המתמקדים בזיהוי סמנים ביולוגיים לעמידות לתרופות ובחינת אסטרטגיות טיפול משולבות לשיפור התוצאות הטיפוליות. הרלוונטיות שלהם להבנת הביולוגיה של סרטן השד האגרסיבי ולפיתוח טיפולים יעילים מדגישה את חשיבותו של קו התאים HCC1954 במחקר אונקולוגי.
- Tissue
- שד
- Disease
- קרצינומה
- Synonyms
- HCC-1954
- Hamon Cancer Center 1954
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- אפיתל
04Identifiers
- Citation
- HCC1954 (מספר קטלוגי Cytion 305268)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1259
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- קולטן אסטרוגן -, קולטן פרוגסטרון -
- Protein expression
- גליקופרוטאין אפיתל 2 (EGP2), ציטוקראטין 19
- Oncogenes
- Her2/neu+ (ביטוי יתר)
- Mutational profile
- מוטציה: PIK3CA, p.His1047Arg (c.3140A>G); מוטציה: TP53, p.Tyr163Cys (c.488A>G); מיזוג גנים: CLTC + VMP1 = CLTC-VMP1
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתמיסה 10% FBS, הוסף 2.5 גרם/ליטר גלוקוז, 10 מ"מ HEPES ו-1 מ"מ נתרן פירובט
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 61 שנים
- Ethnicity
- הודו המזרחית
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
10Product details
- Composition table
