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HCC1954
Gewebe
Brust
Krankheit
Karzinom
Synonyme
HCC-1954, Hamon Cancer Center 1954

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HCC1954

Cell line · Artikelnummer 305268

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die HCC1954-Zelllinie wird aus dem primären duktalen Karzinom einer erwachsenen Brustkrebspatientin gewonnen. Diese Zelllinie wird vor allem in der Brustkrebsforschung eingesetzt, insbesondere zur Untersuchung der genetischen und molekularen Merkmale von HER2-positivem (HER2+) und dreifach negativem Brustkrebs. HCC1954-Zellen sind HER2-überexprimierend und weisen Mutationen im PIK3CA-Gen auf, was sie zu einem wertvollen Modell für die Untersuchung der Signalwege macht, die an der Krebsprogression und der Entwicklung gezielter Therapien beteiligt sind.

HCC1954-Zellen weisen eine epitheliale Morphologie auf und sind sowohl in vitro als auch in vivo für ihre aggressiven Wachstumseigenschaften bekannt. Sie exprimieren Marker, die mit aggressiven Brustkrebs-Phänotypen in Verbindung gebracht werden, darunter HER2/neu, aber keine Expression von Östrogenrezeptor (ER) und Progesteronrezeptor (PR), was sie als dreifach negative Brustkrebszellen klassifiziert. Diese Zelllinie wird ausgiebig genutzt, um die Wirksamkeit und die Wirkmechanismen von Therapien zu untersuchen, die auf HER2 abzielen, wie z. B. Trastuzumab, sowie von neuen PI3K-Inhibitoren. Darüber hinaus werden HCC1954-Zellen in der Forschung zur Identifizierung von Biomarkern für Arzneimittelresistenz und zur Erforschung von Kombinationsbehandlungsstrategien zur Verbesserung der therapeutischen Ergebnisse eingesetzt. Ihre Relevanz für das Verständnis der Biologie des aggressiven Brustkrebses und für die Entwicklung wirksamer Behandlungen unterstreicht die Bedeutung der HCC1954-Zelllinie in der onkologischen Forschung.

Gewebe
Brust
Krankheit
Karzinom
Synonyme
  • HCC-1954
  • Hamon Cancer Center 1954

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial

04Bezeichner

Quellenangabe
HCC1954 (Cytion-Katalognummer 305268)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1259

05Expression und Anfälligkeit

Exprimierte Rezeptoren
Östrogenrezeptor -, Progesteronrezeptor -
Proteinexpression
Epitheliales Glykoprotein 2 (EGP2), Zytokeratin 19
Onkogene
Her2/neu+ (überexprimiert)
Mutationsprofil
Mutation: PIK3CA, p.His1047Arg (c.3140A>G); Mutation: TP53, p.Tyr163Cys (c.488A>G); Genfusion: CLTC + VMP1 = CLTC-VMP1

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10 % FBS, fügen Sie 2,5 g/L Glukose, 10 mM HEPES und 1 mM Natriumpyruvat hinzu
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
61 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Ostindisch

10Produktdetails

Zusammensetzungstabelle