Pāriet uz saturu
HCC1954
Audums
Krūtis
Slimība
Karcinoma
Sinonīmi
HCC-1954, Hamon Cancer Center 1954

Dokumenti

HCC1954

Cell line · Preces numurs 305268

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

HCC1954 šūnu līnija ir iegūta no cilvēka, kas ir pieaugušais krūts vēža pacients, primārās duktālās karcinomas. Šī šūnu līnija tiek plaši izmantota krūts vēža pētījumos, jo īpaši HER2 pozitīva (HER2+) un trīskārši negatīva krūts vēža ģenētisko un molekulāro īpašību izpētei. HCC1954 šūnām ir HER2-overekspresija un mutācijas PIK3CA gēnā, tāpēc tās ir vērtīgs modelis vēža progresēšanā iesaistīto signālu ceļu izpētei un mērķterapijas izstrādei.

HCC1954 šūnām ir epitēlija morfoloģija, un tās ir pazīstamas ar savām agresīvām augšanas īpašībām gan in vitro, gan in vivo. Tās ekspresē marķierus, kas saistīti ar agresīvu krūts vēža fenotipu, tostarp HER2/neu, bet neuzrāda estrogēnu receptoru (ER) un progesterona receptoru (PR), kas tās klasificē kā trīskārši negatīvas krūts vēža šūnas. Šo šūnu līniju plaši izmanto, lai novērtētu HER2 mērķterapiju, piemēram, trastuzumaba, kā arī jaunu PI3K inhibitoru efektivitāti un darbības mehānismus. Turklāt HCC1954 šūnas tiek izmantotas pētījumos, kas vērsti uz zāļu rezistences biomarķieru noteikšanu un kombinētās ārstēšanas stratēģiju izpēti, lai uzlabotu terapeitiskos rezultātus. HCC1954 šūnu līnijas nozīme agresīva krūts vēža bioloģijas izpratnē un efektīvu ārstēšanas metožu izstrādē uzsver HCC1954 šūnu līnijas nozīmi onkoloģiskajos pētījumos.

Audums
Krūtis
Slimība
Karcinoma
Sinonīmi
  • HCC-1954
  • Hamon Cancer Center 1954

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija

04Identifikatori

Atsauce
HCC1954 (Cytion kataloga numurs 305268)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1259

05Pazīmes un uzņēmība

Ekspresētie receptori
Estrogēnu receptoru -, progesterona receptoru -
Proteīnu ekspresija
Epitēlija glikoproteīns 2 (EGP2), citokeratīns 19
Onkogēni
Her2/neu+ (ar pārmērīgu ekspresiju)
Mutāciju profils
Mutācija: His1047Arg (c.3140A>G); mutācija: PIK3CA, p.His1047Arg (c.3140A>G); mutācija: TP53, p.Tyr163Cys (c.488A>G); gēnu sintēze: CLTC + VMP1 = CLTC-VMP1

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildiniet barotni ar 10% FBS, pievienojiet 2,5 g/l glikozes, 10 mM HEPES un 1 mM nātrija piruvāta
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
61 gads
Etniskā piederība
Austrumindijas

10Informācija par produktu

Sastāva tabula