Mine otse sisu juurde
HCC1954
Kude
Rind
Haigus
Kartsinoom
Sünonüümid
HCC-1954, Hamon Cancer Center 1954

Dokumendid

HCC1954

Cell line · Toote number 305268

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

HCC1954 rakuliin on saadud inimese täiskasvanud rinnavähiga patsiendi primaarsest duktaalsest kartsinoomist. Seda rakuliini kasutatakse silmapaistvalt rinnavähiuuringutes, eriti HER2-positiivsete (HER2+) ja kolmiknegatiivsete rinnavähi geneetiliste ja molekulaarsete omaduste uurimiseks. HCC1954 rakud ekspresseerivad HER2-d ja neil on mutatsioonid PIK3CA geenis, mistõttu on nad väärtuslik mudel vähi progresseerumisega seotud signaaliradade uurimiseks ja sihtotstarbeliste ravimeetodite väljatöötamiseks.

HCC1954 rakkudel on epiteliaalne morfoloogia ja nad on tuntud oma agressiivsete kasvuomaduste poolest nii in vitro kui ka in vivo. Nad ekspresseerivad agressiivse rinnavähi fenotüübiga seotud markereid, sealhulgas HER2/neu, kuid neil puudub östrogeeni retseptori (ER) ja progesterooni retseptori (PR) ekspressioon, mis klassifitseerib neid kolmiknegatiivsete rinnavähirakkudena. Seda rakuliini kasutatakse laialdaselt HER2-le suunatud ravimeetodite, näiteks trastuzumabi, ning uute PI3K-inhibiitorite tõhususe ja toimemehhanismide hindamiseks. Lisaks kasutatakse HCC1954 rakke teadusuuringutes, mis keskenduvad ravimiresistentsuse biomarkerite tuvastamisele ja kombineeritud ravistrateegiate uurimisele, et parandada ravitulemusi. Nende tähtsus agressiivse rinnavähi bioloogia mõistmisel ja tõhusa ravi väljatöötamisel rõhutab HCC1954 rakuliini tähtsust onkoloogilistes uuringutes.

Kude
Rind
Haigus
Kartsinoom
Sünonüümid
  • HCC-1954
  • Hamon Cancer Center 1954

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel

04Tunnused

Viide
HCC1954 (Cytioni katalooginumber 305268)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1259

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Ekspresseeritud retseptorid
Östrogeeni retseptor -, progesterooni retseptor -
Valgu ekspressioon
Epiteeli glükoproteiin 2 (EGP2), tsütokeratiin 19
Onkogeenid
Her2/neu+ (üleekspresseeritud)
Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: PIK3CA, p.His1047Arg (c.3140A>G); Mutatsioon: PIK3CA, p.His1047Arg (c.3140A>G): TP53, p.Tyr163Cys (c.488A>G); geenifusioon: TP53, p.Tyr163Cys (c.488A>G): CLTC + VMP1 = CLTC-VMP1

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga, lisada 2,5 g/l glükoosi, 10 mM HEPES ja 1mM naatriumpüruvaati
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
61 aastat
Etniline kuuluvus
Ida-India

10Toote üksikasjad

Koostis tabel