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HCC1954
Tecido
Peito
Doença
Carcinoma
Sinónimos
HCC-1954, Hamon Cancer Center 1954

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HCC1954

Cell line · Número do produto 305268

€550.00sem impostos nem portes de envio

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1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular HCC1954 é derivada do carcinoma ductal primário de um doente adulto com cancro da mama. Esta linha celular é utilizada de forma proeminente na investigação do cancro da mama, especialmente para investigar as caraterísticas genéticas e moleculares dos cancros da mama HER2-positivos (HER2+) e triplo-negativos. As células HCC1954 são HER2-overexpressing e possuem mutações no gene PIK3CA, o que as torna um modelo valioso para o estudo das vias de sinalização envolvidas na progressão do cancro e no desenvolvimento de terapias específicas.

As células HCC1954 apresentam uma morfologia epitelial e são conhecidas pelas suas caraterísticas de crescimento agressivo, tanto in vitro como in vivo. Expressam marcadores associados a fenótipos agressivos de cancro da mama, incluindo HER2/neu, mas não expressam o recetor de estrogénio (ER) e o recetor de progesterona (PR), o que as classifica como células de cancro da mama triplo-negativas. Esta linha celular é amplamente utilizada para avaliar a eficácia e os mecanismos de ação de terapias orientadas para o HER2, como o trastuzumab, bem como de novos inibidores da PI3K. Além disso, as células HCC1954 são utilizadas em investigação centrada na identificação de biomarcadores de resistência aos medicamentos e na exploração de estratégias de tratamento combinado para melhorar os resultados terapêuticos. A sua relevância para a compreensão da biologia do cancro da mama agressivo e para o desenvolvimento de tratamentos eficazes realça a importância da linha celular HCC1954 na investigação oncológica.

Tecido
Peito
Doença
Carcinoma
Sinónimos
  • HCC-1954
  • Hamon Cancer Center 1954

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Epitelial

04Identificadores

Referência
HCC1954 (número de catálogo Cytion 305268)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1259

05Expressão e suscetibilidade

Receptores expressos
Recetor de estrogénio -, recetor de progesterona -
Expressão proteica
Glicoproteína epitelial 2 (EGP2), citoqueratina 19
Oncogenes
Her2/neu+ (sobreexpressão)
Perfil mutacional
Mutação: PIK3CA, p.His1047Arg (c.3140A>G); Mutação: TP53, p.Tyr163Cys (c.488A>G); Fusão de genes: CLTC + VMP1 = CLTC-VMP1

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS, adicionar 2,5 g/L de glucose, 10 mM de HEPES e 1mM de piruvato de sódio
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
61 anos
Etnia
Índio Oriental

10Detalhes do produto

Tabela de composição