01General information
- Description
קו התאים T98G הוא מודל של גליובלסטומה מולטיפורמה אנושית שמקורו בחולה בן 61. הוא הוקם כדי לחקור את המנגנונים המולקולריים של התפתחות גידולים, התרבות תאים ושינוי תאים. תאי T98G מציגים שילוב ייחודי של מאפיינים תאיים נורמליים ומומרים, מה שהופך אותם למודל חשוב לחקר הביולוגיה של הסרטן. באופן ספציפי, בעוד שתאי T98G הם תאים בלתי מתים ומסוגלים לצמוח ללא עוגן, הם שומרים על היכולת לעבור מעבר לשלב G1 בתנאים של שלב סטציונרי, תכונה האופיינית לתאים נורמליים.
מבחינת מאפייני הצמיחה, תאי T98G מציגים עצמאות מהתקשרות, כפי שמודגם ביכולתם ליצור מושבות במתילצלולוזה, מדיום חצי-מוצק. עם זאת, בניגוד לקווי תאים רבים שעברו שינוי, הם נעצרים בשלב G1 של מחזור התא כאשר הם נתונים לתנאים של צפיפות תאים גבוהה או ריכוז נמוך של סרום. יכולת ייחודית זו לעבור מעצר G1 בתנאים אלה מבדילה את T98G מקווי תאים סרטניים אחרים, כגון HeLa או תאי T98 ההוריים, הממשיכים להתרבות בנסיבות דומות. פנוטיפ זה מצביע על כך שלמרות שתאי T98G עברו שינוי, הם שומרים על מנגנוני ויסות מסוימים השולטים בהתקדמות מחזור התא.
מבחינה ציטוגנטית, תאי T98G הם אנאופלואידיים במידה רבה, עם מספר כרומוזומים מודאלי של 124-126, המעיד על חוסר יציבות כרומוזומלית משמעותית. נוכחותם של כרומוזומים סמנים וכרומוזומים זעירים בקריוטיפ שלהם משקפת עוד יותר את השינויים הגנטיים הנפוצים הקשורים לגליובלסטומה מולטיפורמה. למרות אופיין המוטציה והאנאופלואידי, תאי T98G אינם גורמים לגידולים כאשר הם מוזרקים לעכברים עירומים, מה שמראה כי עצמאות עגינה לבדה אינה מספיקה לגידולים.
קו התאים T98G משמש ככלי חשוב לחקר התקדמות גליובלסטומה, ויסות מחזור התא, והאינטראקציה בין התנהגויות תאיות נורמליות ומוטציות. יכולתו לשמור על היבטים של עצירת G1 נורמלית הופכת אותו למודל שימושי במיוחד לחקר המנגנונים העומדים בבסיס המוטציה התאית, נקודות הבקרה של מחזור התא, ומטרות טיפוליות לגליובלסטומה.
- Tissue
- מוח
- Disease
- גליובלסטומה
- Synonyms
- T 98 G
- T-98G
- T98 G
- T98-G
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- פיברובלסט
- Doubling time
- 40 שעות
04Identifiers
- Citation
- T98G (מספר קטלוג Cytion 305030)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0556
05Handling and culture
- Culture medium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים ב-50% מדיום בסיסי + 40% FBS + 10% DMSO, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקירור.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
07Donor
- Donor age
- 61 שנים
- Ethnicity
- אירופאי
08Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
