Prejsť na obsah
T98G
Tkanivo
Mozog
Choroba
Glioblastóm
Synonymá
T 98 G, T-98G, T98 G, T98-G

Dokumenty

T98G

Cell line · Číslo výrobku 305030

The T98G cell line is a human glioblastoma multiforme model derived from a 61-year-old male patient. It was established to study the molecular mechanisms ...

€430.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia T98G je model ľudského multiformného glioblastómu získaný od 61-ročného muža. Bola vytvorená na štúdium molekulárnych mechanizmov tumorigenézy, bunkovej proliferácie a transformácie. Bunky T98G vykazujú jedinečnú kombináciu normálnych aj transformovaných bunkových charakteristík, čo z nich robí cenný model na skúmanie biológie rakoviny. Konkrétne, hoci sú bunky T98G nesmrteľné a schopné rastu nezávislého od ukotvenia, zachovávajú si schopnosť zastaviť G1 fázu v podmienkach stacionárnej fázy, čo je vlastnosť typická pre normálne bunky.

Pokiaľ ide o rastové charakteristiky, bunky T98G vykazujú nezávislosť od ukotvenia, čo dokazuje ich schopnosť vytvárať kolónie v polotuhom médiu metylcelulóze. Na rozdiel od mnohých transformovaných bunkových línií sa však zastavia v G1 fáze bunkového cyklu, keď sú vystavené podmienkam vysokej hustoty buniek alebo nízkej koncentrácii séra. Táto jedinečná schopnosť zastaviť G1 za týchto podmienok odlišuje T98G od iných rakovinových bunkových línií, ako sú HeLa alebo rodičovské bunky T98, ktoré sa za podobných podmienok naďalej množia. Tento fenotyp naznačuje, že hoci sú bunky T98G transformované, zachovávajú si určité regulačné mechanizmy, ktoré kontrolujú progresiu bunkového cyklu.

Cytogeneticky sú bunky T98G vysoko aneuploidné, s modálnym počtom chromozómov 124-126, čo naznačuje značnú chromozomálnu nestabilitu. Prítomnosť markerových chromozómov a miniatúrnych chromozómov v ich karyotype ďalej odráža genetické zmeny bežne spojené s multiformným glioblastómom. Napriek svojej transformovanej a aneuploidnej povahe nie sú bunky T98G pri injekčnom podaní nahým myšiam nádorovo aktívne, čo dokazuje, že samotná nezávislosť od ukotvenia nie je dostatočná pre nádorovú aktivitu.

Bunková línia T98G slúži ako dôležitý nástroj na štúdium progresie glioblastómu, regulácie bunkového cyklu a interakcie medzi normálnym a transformovaným bunkovým správaním. Jej schopnosť zachovať si aspekty normálneho zastavenia G1 z nej robí obzvlášť užitočný model na skúmanie mechanizmov, ktoré sú základom bunkovej transformácie, kontrolných bodov bunkového cyklu a terapeutických cieľov pre glioblastóm.

Tkanivo
Mozog
Choroba
Glioblastóm
Synonymá
  • T 98 G
  • T-98G
  • T98 G
  • T98-G

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Fibroblasty
Doba zdvojnásobenia
40 hodín

04Identifikátory

Citácia
T98G (katalógové číslo Cytion 305030)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0556

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamín, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion číslo článku 820100a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10% FBS a 1% NEAA
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame 50 % bazálne médium + 40 % FBS + 10 % DMSO alebo CM-1 (katalógové číslo Cytion 800100), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie regenerácie a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Vek darcu
61 rokov
Etnická príslušnosť
Európska