Přejít na obsah
T98G
Tkáň
Mozek
Nemoc
Glioblastom
Synonyma
T 98 G, T-98G, T98 G, T98-G

Dokumenty

T98G

Cell line · Číslo výrobku 305030

The T98G cell line is a human glioblastoma multiforme model derived from a 61-year-old male patient. It was established to study the molecular mechanisms ...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie T98G je model lidského multiformního glioblastomu odvozený od 61letého pacienta. Byla založena za účelem studia molekulárních mechanismů nádorového bujení, buněčné proliferace a transformace. Buňky T98G vykazují jedinečnou kombinaci vlastností normálních i transformovaných buněk, což z nich činí cenný model pro zkoumání biologie nádorových onemocnění. Konkrétně, zatímco buňky T98G jsou nesmrtelné a schopné růstu nezávislého na ukotvení, zachovávají si schopnost zástavy G1 fáze za podmínek stacionární fáze, což je vlastnost typická pro normální buňky.

Pokud jde o růstové charakteristiky, buňky T98G vykazují nezávislost na ukotvení, což se projevuje jejich schopností vytvářet kolonie v polotuhém médiu methylcelulose. Na rozdíl od mnoha transformovaných buněčných linií se však zastaví v G1 fázi buněčného cyklu, pokud jsou vystaveny podmínkám vysoké buněčné hustoty nebo nízké koncentrace séra. Tato jedinečná schopnost zástavy G1 za těchto podmínek odlišuje T98G od jiných nádorových buněčných linií, jako je HeLa nebo rodičovské buňky T98, které se za podobných podmínek dále množí. Tento fenotyp naznačuje, že i když jsou buňky T98G transformované, zachovávají si určité regulační mechanismy, které řídí progresi buněčného cyklu.

Cytogeneticky jsou buňky T98G vysoce aneuploidní, s modálním počtem chromozomů 124-126, což svědčí o značné chromozomální nestabilitě. Přítomnost markerových chromozomů a drobných chromozomů v jejich karyotypu dále odráží genetické změny běžně spojené s multiformním glioblastomem. Navzdory své transformované a aneuploidní povaze nejsou buňky T98G při injekčním podání nahým myším tumorigenní, což dokazuje, že samotná nezávislost na ukotvení není pro tumorigenitu dostatečná.

Buněčná linie T98G slouží jako důležitý nástroj pro studium progrese glioblastomu, regulace buněčného cyklu a interakce mezi normálním a transformovaným buněčným chováním. Její schopnost zachovat si aspekty normální zástavy G1 z ní činí obzvláště užitečný model pro zkoumání mechanismů, které jsou základem buněčné transformace, kontrolních bodů buněčného cyklu a terapeutických cílů pro glioblastom.

Tkáň
Mozek
Nemoc
Glioblastom
Synonyma
  • T 98 G
  • T-98G
  • T98 G
  • T98-G

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Fibroblasty
Doba zdvojnásobení
40 hodin

04Identifikátory

Citace
T98G (katalogové číslo Cytion 305030)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0556

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS (číslo článku Cytion 820100a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS a 1 % NEAA
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme 50% základní médium + 40% FBS + 10% DMSO nebo CM-1 (katalogové číslo Cytion 800100), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu vyvolaného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
61 let
Etnická příslušnost
Evropská