01General information
- Description
T98G 细胞系是一种人类多形性胶质母细胞瘤模型,来源于一名 61 岁的男性患者。它的建立是为了研究肿瘤发生、细胞增殖和转化的分子机制。T98G 细胞同时具有正常细胞和转化细胞的特征,因此是研究癌症生物学的重要模型。具体来说,虽然 T98G 细胞是不死的,能进行不依赖锚定的生长,但它们仍能在静止期条件下进行 G1 期停滞,而这是正常细胞通常具有的特性。
就生长特性而言,T98G 细胞具有锚定独立性,这表现在它们能在甲基纤维素(一种半固体培养基)中形成菌落。然而,与许多转化细胞系不同的是,当细胞密度较高或血清浓度较低时,它们会停滞在细胞周期的 G1 期。这种在这些条件下发生 G1 期停滞的独特能力使 T98G 有别于 HeLa 或亲本 T98 细胞等其他癌细胞系,后者在类似情况下会继续增殖。这种表型表明,虽然 T98G 细胞发生了转化,但它们保留了某些控制细胞周期进展的调节机制。
从细胞遗传学角度看,T98G 细胞高度非整倍体,染色体数目模数为 124-126,表明染色体极不稳定。其核型中标记染色体和微小染色体的存在进一步反映了多形性胶质母细胞瘤常见的基因改变。尽管 T98G 细胞具有转化和非整倍体性质,但将其注射到裸鼠体内不会致瘤,这表明仅靠锚定独立性不足以致瘤。
T98G 细胞系是研究胶质母细胞瘤进展、细胞周期调控以及正常细胞行为和转化细胞行为之间相互作用的重要工具。它能保留正常 G1 停滞的某些方面,这使它成为探索细胞转化、细胞周期检查点和胶质母细胞瘤治疗靶点机制的一个特别有用的模型。
- Tissue
- 大脑
- Disease
- 胶质母细胞瘤
- Synonyms
- T 98 G
- T-98G
- T98 G
- T98-G
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 成纤维细胞
- Doubling time
- 40 小时
04Identifiers
- Citation
- T98G(Cytion 产品编号 305030)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0556
05Handling and culture
- Culture medium
- EMEM(MEM Eagle),w:2 mM L-谷氨酰胺,w:2.2 g/L NaHCO3,w:EBSS(Cytion 文章编号 820100a)。
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Supplements
- 在培养基中添加 10% FBS 和 1% NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
- Fluid renewal
- 每周 2 至 3 次
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。
为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。
- Freeze medium
- 作为冷冻保存培养基,我们使用 50% 基础培养基 + 40% FBS + 10% DMSO 或 CM-1(Cytion 目录号 800100),其中包括优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,以促进恢复并减少冷冻引起的应激。
- Storage conditions
如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
07Donor
- Donor age
- 61 年
- Ethnicity
- 欧洲
08Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时,必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时,必须穿戴适当的防护手套和防护服,并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险,因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Warranty
在Cytion,我们保证产品的质量和活力。 我们保证,从我们的工厂发货后 60 天内,我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息,请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
