01General information
- Description
T98G 細胞系是一種源自一名 61 歲男性患者的人類多形性膠質母細胞瘤模型。該細胞系的建立旨在研究腫瘤發生、細胞增殖及轉化過程的分子機制。 T98G 細胞同時具備正常細胞與轉化細胞的獨特特徵組合,使其成為研究癌症生物學的寶貴模型。具體而言,儘管 T98G 細胞具有不朽性且能進行非依附性生長,但在靜止期條件下,它們仍保留進入 G1 期停滯的能力,這項特性通常與正常細胞相關。
就生長特性而言,T98G 細胞展現出錨定獨立性,這從其能在半固體培養基——甲基纖維素中形成集落的能力即可證實。然而,與許多轉化細胞系不同的是,當處於高細胞密度或低血清濃度的條件下時,它們會在細胞週期的 G1 期停滯。 這種在上述條件下發生 G1 期停滯的獨特能力,使 T98G 細胞有別於其他癌細胞系(例如 HeLa 或其親代細胞 T98),後者在類似情況下仍會持續增殖。此表型表明,儘管 T98G 細胞已發生轉化,但仍保留了某些控制細胞週期進程的調節機制。
從細胞遺傳學角度來看,T98G 細胞具有高度非整倍體特性,其模態染色體數為 124-126,顯示出顯著的染色體不穩定性。 其核型中存在標記染色體和微小染色體,進一步反映了常見於多形性膠質母細胞瘤的遺傳變異。儘管具有轉化與非整倍體的特性,但將 T98G 細胞注射至裸鼠體內時並不會形成腫瘤,這證明僅憑附著獨立性尚不足以引發腫瘤形成。
T98G 細胞系是研究膠質母細胞瘤進展、細胞週期調控,以及正常與轉化細胞行為之間相互作用的重要工具。其保留部分正常 G1 期停滯特性的能力,使其成為探索細胞轉化機制、細胞週期檢查點以及膠質母細胞瘤治療靶點的特別有用的模型。
- Tissue
- 大腦
- Disease
- 膠質母細胞瘤
- Synonyms
- T 98 G
- T-98G
- T98 G
- T98-G
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 成纖維細胞
- Doubling time
- 40 小時
04Identifiers
- Citation
- T98G(Cytion 型號 305030)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0556
05Handling and culture
- Culture medium
- EMEM(MEM Eagle),含 2 mM L-谷氨醯胺,含 2.2 g/L NaHCO₃,含 EBSS(Cytion 產品編號 820100a)
- Incubation atmosphere
37°C,5% CO₂,加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% FBS 和 1% NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Fluid renewal
- 每週 2 至 3 次
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基,我們使用 50% 基礎培養基 + 40% 胎牛血清 (FBS) + 10% 二甲基亞砜 (DMSO),或 CM-1(Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提高細胞存活率並減輕冷凍引起的應激。
- Storage conditions
若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
07Donor
- Donor age
- 61年
- Ethnicity
- 歐洲的
08Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍,必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服,且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時,必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險,此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion,我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證,自本公司設施出貨後 60 天內,我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及/或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
