NCI-H1755

A NCI-H1755 é uma linhagem celular humana de câncer de pulmão de células não pequenas (NSCLC) derivada de um adenocarcinoma pulmonar. Ela faz parte do extenso painel de modelos de câncer torácico do Instituto Nacional do Câncer (NCI), desenvolvido para apoiar a pesquisa translacional sobre a biologia do câncer de pulmão e a resposta terapêutica. Essa linhagem celular apresenta uma mutação no gene KRAS, uma característica comum em muitos adenocarcinomas de pulmão que contribui para a ativação constitutiva das vias de sinalização MAPK e PI3K, promovendo o crescimento celular descontrolado e a resistência a certas terapias direcionadas.

A NCI-H1755 está incluída em várias triagens genômicas funcionais e farmacogenômicas em grande escala, incluindo aquelas que traçam o perfil da expressão de proteínas e da resposta a agentes direcionados. Sua assinatura molecular indica atividade nas vias de sinalização PI3K/AKT e RAS/RAF/MEK, o que a tornou uma ferramenta valiosa para avaliar os efeitos de inibidores de MEK e outros agentes direcionados a moléculas efetoras a jusante. A linhagem celular também contribuiu para pesquisas focadas na polaridade epitelial, com estudos que identificaram alterações estruturais em genes do complexo de polaridade, como o PARD3, em vários tipos de câncer epitelial, incluindo o adenocarcinoma de pulmão.

In vitro, as células NCI-H1755 crescem em monocamadas aderentes e apresentam morfologia epitelial. Elas são mantidas sob condições padrão de cultura no meio RPMI-1640 suplementado com 10% de soro fetal bovino. Devido às suas características de crescimento reproduzíveis, ao perfil mutacional e à inclusão em conjuntos de dados de oncologia molecular, a NCI-H1755 é um modelo frequentemente utilizado para investigar mecanismos de progressão tumoral, resistência a medicamentos e alvos terapêuticos potenciais no NSCLC com mutação no KRAS.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.