PAC2

A PAC2 é uma linhagem celular de fibroblastos embrionários do peixe-zebra, derivada de embriões com 24 horas após a fertilização (hpf). Essa linhagem celular é amplamente utilizada em estudos de biologia do desenvolvimento, toxicologia e expressão gênica, dado o papel do peixe-zebra como um importante organismo-modelo para a biologia dos vertebrados. As células PAC2 são aderentes e crescem como uma monocamada em cultura, exibindo morfologia típica de fibroblastos sob condições padrão de crescimento. Elas oferecem uma plataforma versátil para manipulação genética e genômica funcional na pesquisa com peixe-zebra.

Foi demonstrado que as células PAC2 apresentam estabilidade genética, com conteúdo de DNA nuclear consistente com o das células somáticas do peixe-zebra. Elas permitem a transferência gênica por meio de vários métodos, incluindo transfecção mediada por lipídios e nucleofecção. Embora as eficiências de transfecção sejam moderadas, protocolos otimizados podem alcançar uma captação significativa de DNA, possibilitando modificações genéticas transitórias e estáveis. A análise do transcriptoma revelou perfis de expressão únicos nas células PAC2 em comparação com outras linhagens celulares do peixe-zebra, embriões e tecidos adultos, destacando seu potencial para o estudo da expressão gênica específica de células e das vias de sinalização.

Essa linhagem celular é fundamental em pesquisas que exploram os mecanismos celulares e moleculares do desenvolvimento de vertebrados, do câncer e da resposta a fatores ambientais. Ela também é empregada em estudos envolvendo cicatrização de feridas e resposta sérica, já que as células PAC2 exibem alterações transcricionais distintas quando expostas a fatores de crescimento. A versatilidade e as propriedades únicas da PAC2 a tornam uma ferramenta essencial para o avanço da pesquisa baseada no peixe-zebra e de estudos comparativos entre modelos de vertebrados.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.