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PAC2
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PAC2

Cell line · Artikelnummer 305489

PAC2 ist eine embryonale Fibroblasten-Zelllinie des Zebrafisches, die aus Embryonen im Stadium von 24 Stunden nach der Befruchtung (hpf) gewonnen wurde. Diese Zelllinie findet breite Anwendung in der Entwicklungsforschung...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

PAC2 ist eine embryonale Fibroblasten-Zelllinie des Zebrafisches, die aus Embryonen im Alter von 24 Stunden nach der Befruchtung (hpf) gewonnen wurde. Diese Zelllinie findet in der Entwicklungsbiologie, Toxikologie und bei Untersuchungen zur Genexpression breite Anwendung, da der Zebrafisch als bedeutender Modellorganismus für die Wirbeltierbiologie gilt. PAC2-Zellen sind adhärent und wachsen in Kultur als Monoschicht, wobei sie unter Standardwachstumsbedingungen eine typische Fibroblastenmorphologie aufweisen. Sie bieten eine vielseitige Plattform für genetische Manipulationen und funktionelle Genomik in der Zebrafischforschung.

PAC2-Zellen weisen nachweislich genetische Stabilität auf, wobei der Gehalt an Kern-DNA mit dem von somatischen Zellen des Zebrafisches übereinstimmt. Sie ermöglichen den Gentransfer durch verschiedene Methoden, darunter die lipidvermittelte Transfektion und die Nukleofektion. Zwar ist die Transfektionseffizienz mäßig, doch lassen sich mit optimierten Protokollen eine signifikante DNA-Aufnahme erzielen, was sowohl transiente als auch stabile genetische Modifikationen ermöglicht. Transkriptomanalysen haben im Vergleich zu anderen Zebrafisch-Zelllinien, Embryonen und adulten Geweben einzigartige Expressionsprofile in PAC2-Zellen aufgezeigt, was ihr Potenzial für die Untersuchung zellspezifischer Genexpression und Signalwege unterstreicht.

Diese Zelllinie spielt eine entscheidende Rolle in der Forschung zur Erforschung der zellulären und molekularen Mechanismen der Wirbeltierentwicklung, von Krebserkrankungen und der Reaktion auf Umweltfaktoren. Sie wird auch in Studien zur Wundheilung und Serumreaktion eingesetzt, da PAC2-Zellen bei Exposition gegenüber Wachstumsfaktoren deutliche transkriptionelle Veränderungen aufweisen. Die Vielseitigkeit und die einzigartigen Eigenschaften von PAC2 machen sie zu einem unverzichtbaren Werkzeug für den Fortschritt der auf Zebrafischen basierenden Forschung und für vergleichende Studien an verschiedenen Wirbeltiermodellen.

Gewebe
Embryo
Synonyme
  • PAC-2

02Klassifizierung

Organismus
Zebrafisch
Sex
Nicht näher bezeichnet
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Fibroblastenähnlich
Zelltyp
Fibroblasten
Verdopplungszeit
36 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
PAC2 (Cytion-Katalognummer 305489)
NCBI-Steuer-ID
7955
Cellosaurus
CVCL_5853

05Handhabung und Kultur

Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Dissoziationsreagenz
Accutase
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
2 Fötustage