PAC2

A PAC2 é uma linha celular de fibroblastos embrionários do peixe-zebra, derivada de embriões com 24 horas após a fertilização (hpf). Esta linha celular é amplamente utilizada em estudos de biologia do desenvolvimento, toxicologia e expressão génica, dado o papel do peixe-zebra como um importante organismo-modelo para a biologia dos vertebrados. As células PAC2 são aderentes e crescem como uma monocamada em cultura, apresentando a morfologia típica dos fibroblastos em condições de crescimento padrão. Constituem uma plataforma versátil para a manipulação genética e a genómica funcional na investigação com o peixe-zebra.

Demonstrou-se que as células PAC2 apresentam estabilidade genética, com um conteúdo de ADN nuclear consistente com o das células somáticas do peixe-zebra. Suportam a transferência genética através de vários métodos, incluindo a transfecção mediada por lípidos e a nucleofecção. Embora as eficiências de transfecção sejam moderadas, protocolos otimizados podem alcançar uma absorção significativa de ADN, permitindo modificações genéticas transitórias e estáveis. A análise do transcriptoma revelou perfis de expressão únicos nas células PAC2, em comparação com outras linhas celulares do peixe-zebra, embriões e tecidos adultos, destacando o seu potencial para o estudo da expressão génica específica das células e das vias de sinalização.

Esta linha celular é fundamental na investigação que explora os mecanismos celulares e moleculares do desenvolvimento dos vertebrados, do cancro e da resposta a fatores ambientais. É também utilizada em estudos que envolvem a cicatrização de feridas e a resposta sérica, uma vez que as células PAC2 apresentam alterações transcricionais distintas quando expostas a fatores de crescimento. A versatilidade e as propriedades únicas da PAC2 tornam-na uma ferramenta essencial para o avanço da investigação baseada no peixe-zebra e de estudos comparativos entre modelos de vertebrados.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia