Mine otse sisu juurde
PAC2
Kude
Embrüo
Sünonüümid
PAC-2

Dokumendid

PAC2

Cell line · Toote number 305489

PAC2 on sebrafishi embrüonaalne fibroblastide rakuliin, mis on saadud 24 tundi pärast viljastumist (hpf) olevatest embrüotest. Seda rakuliini kasutatakse laialdaselt arengu uurimisel...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

PAC2 on zebrakala embrüonaalsete fibroblastide rakuliin, mis on saadud 24 tundi pärast viljastumist (hpf) olevatest embrüotest. Seda rakuliini kasutatakse laialdaselt arengubioloogias, toksikoloogias ja geeniekspressiooni uuringutes, arvestades zebrakala rolli selgroogsete bioloogia olulise mudelorganismina. PAC2-rakud on adhesiivsed ja kasvavad kultuuris ühekihilisena, näidates standardsetes kasvutingimustes tüüpilist fibroblastide morfoloogiat. Need pakuvad mitmekülgset platvormi geneetiliseks manipuleerimiseks ja funktsionaalse genoomika uurimiseks zebrakalade teadustöös.

On näidatud, et PAC2-rakud on geneetiliselt stabiilsed ning nende tuuma-DNA sisaldus vastab zebrakala somaatiliste rakkude omale. Need rakud toetavad geenide ülekandmist mitmesuguste meetodite abil, sealhulgas lipiidide vahendatud transfektsiooni ja nukleofektsiooni teel. Kuigi transfektsiooni efektiivsus on mõõdukas, võimaldavad optimeeritud protokollid saavutada märkimisväärset DNA omastamist, mis võimaldab nii ajutisi kui ka stabiilseid geneetilisi modifikatsioone. Transkriptoomi analüüs on näidanud, et PAC2-rakkudel on teiste zebrakala rakuliinide, embrüote ja täiskasvanud kudede omadega võrreldes unikaalsed ekspressiooniprofiilid, mis rõhutab nende potentsiaali rakuspetsiifilise geeniekspressiooni ja signaaliteede uurimisel.

See rakuliin on oluline vahend uuringutes, mis uurivad selgroogsete arengu, vähi ja keskkonnateguritele reageerimise rakulisi ja molekulaarseid mehhanisme. Seda kasutatakse ka haavade paranemist ja seerumireaktsiooni käsitlevates uuringutes, kuna PAC2-rakud näitavad kasvufaktorite mõjul selgeid transkriptsioonilisi muutusi. PAC2 mitmekülgsus ja unikaalsed omadused teevad sellest olulise vahendi zebrakalal põhineva teadustöö edendamiseks ja võrdlevateks uuringuteks selgroogsete mudelite vahel.

Kude
Embrüo
Sünonüümid
  • PAC-2

02Klassifikatsioon

Organism
Zebrakala
Sugu
Määratlemata
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Fibroblastilaadsed
Rakutüüp
Fibroblastide
Kahekordistumisaeg
36 tundi

04Tunnused

Viide
PAC2 (Cytioni katalooginumber 305489)
NCBI maksukood
7955
Cellosaurus
CVCL_5853

05Käsitlemine ja kasvatamine

Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
2 loote päeva