PAC2

PAC2 เป็นสายเซลล์ไฟโบรบลาสต์ของตัวอ่อนปลาม้าลาย ที่ได้มาจากตัวอ่อน 24 ชั่วโมงหลังการปฏิสนธิ (hpf) สายเซลล์นี้ถูกใช้อย่างแพร่หลายในสาขาชีววิทยาการพัฒนา ชีววิทยาพิษวิทยา และการศึกษาการแสดงออกของยีน เนื่องจากปลาม้าลายมีบทบาทเป็นสิ่งมีชีวิตแบบจำลองที่สำคัญสำหรับชีววิทยาของสัตว์มีกระดูกสันหลัง เซลล์ PAC2 เป็นเซลล์ที่ติดกับพื้นผิวและเจริญเติบโตเป็นชั้นเดียว (monolayer) ในระบบเพาะเลี้ยง โดยแสดงลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเซลล์ไฟโบรบลาสต์แบบทั่วไปภายใต้เงื่อนไขการเจริญเติบโตมาตรฐาน เซลล์เหล่านี้เป็นแพลตฟอร์มที่หลากหลายสำหรับการปรับเปลี่ยนทางพันธุกรรมและจีโนมิกส์เชิงหน้าที่ในการวิจัยปลาซีบราฟิช

เซลล์ PAC2 ได้แสดงให้เห็นถึงความเสถียรทางพันธุกรรม โดยมีปริมาณ DNA ในนิวเคลียสที่สอดคล้องกับเซลล์โซมาติกของปลาซีบราฟิช เซลล์เหล่านี้รองรับการถ่ายโอนยีนผ่านวิธีการต่าง ๆ รวมถึงการทรานส์เฟคชันด้วยลิพิดและนิวคลีโอเฟคชัน แม้อัตราประสิทธิภาพการทรานส์เฟคชันจะอยู่ในระดับปานกลาง แต่ด้วยโปรโตคอลที่ได้รับการปรับให้เหมาะสม ก็สามารถบรรลุการดูดซึม DNA ได้อย่างมีนัยสำคัญ ซึ่งช่วยให้สามารถทำการดัดแปลงพันธุกรรมแบบชั่วคราวและแบบคงที่ได้ การวิเคราะห์ทรานสคริปโตมได้เปิดเผยโปรไฟล์การแสดงออกของยีนที่เป็นเอกลักษณ์ในเซลล์ PAC2 เมื่อเทียบกับสายเซลล์ปลาซีบราฟิชอื่น ๆ ตัวอ่อน และเนื้อเยื่อของปลาซีบราฟิชผู้ใหญ่ ซึ่งเน้นย้ำถึงศักยภาพของเซลล์เหล่านี้ในการศึกษาการแสดงออกของยีนและเส้นทางสัญญาณเฉพาะเซลล์

สายเซลล์นี้มีบทบาทสำคัญในการวิจัยเพื่อสำรวจกลไกระดับเซลล์และระดับโมเลกุลของการพัฒนาของสัตว์มีกระดูกสันหลัง มะเร็ง และการตอบสนองต่อปัจจัยสิ่งแวดล้อม นอกจากนี้ยังถูกนำมาใช้ในการศึกษาเกี่ยวกับการสมานแผลและการตอบสนองต่อซีรั่ม เนื่องจากเซลล์ PAC2 แสดงการเปลี่ยนแปลงการถอดรหัสที่ชัดเจนเมื่อสัมผัสกับปัจจัยการเจริญเติบโต ความหลากหลายและคุณสมบัติพิเศษของ PAC2 ทำให้มันกลายเป็นเครื่องมือสำคัญในการพัฒนาการวิจัยที่ใช้ปลาซีบราฟิชเป็นแบบจำลอง รวมถึงการศึกษาเปรียบเทียบระหว่างแบบจำลองสัตว์มีกระดูกสันหลังต่าง ๆ

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.