Pāriet uz saturu
PAC2
Audums
Embrijs
Sinonīmi
PAC-2

Dokumenti

PAC2

Cell line · Preces numurs 305489

PAC2 ir zebrafisku embrionālo fibroblastu šūnu līnija, kas iegūta no embrijiem 24 stundas pēc apaugļošanās (hpf). Šo šūnu līniju plaši izmanto attīstības pētījumos...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

PAC2 ir zebrafisku embrionālo fibroblastu šūnu līnija, kas iegūta no embrijiem 24 stundas pēc apaugļošanās (hpf). Šo šūnu līniju plaši izmanto attīstības bioloģijā, toksikoloģijā un gēnu ekspresijas pētījumos, ņemot vērā zebrafisku nozīmīgo lomu kā vadošajam modelorganismam mugurkaulnieku bioloģijā. PAC2 šūnas ir adhezīvas un kultūrā aug kā monoslānis, standarta augšanas apstākļos parādot tipisku fibroblastu morfoloģiju. Tās nodrošina daudzpusīgu platformu ģenētiskajai manipulācijai un funkcionālajai genomikai zebrafisku pētījumos.

Ir pierādīts, ka PAC2 šūnas izrāda ģenētisko stabilitāti, un to kodola DNS saturs atbilst zebrafisku somatisko šūnu DNS saturam. Tās atbalsta gēnu pārnesi, izmantojot dažādas metodes, tostarp lipīdu mediētu transfekciju un nukleofekciju. Lai gan transfekcijas efektivitāte ir vidēja, ar optimizētiem protokoliem var panākt ievērojamu DNS uzsūkšanos, kas ļauj veikt gan īslaicīgas, gan stabilas ģenētiskas modifikācijas. Transkriptoma analīze ir atklājusi unikālus ekspresijas profilus PAC2 šūnās salīdzinājumā ar citām zebrafisku šūnu līnijām, embrijiem un pieaugušo audiem, uzsverot to potenciālu šūnu specifiskas gēnu ekspresijas un signālceļu pētīšanā.

Šī šūnu līnija ir būtiska pētījumos, kuros izpēta mugurkaulnieku attīstības, vēža un reakcijas uz vides faktoriem šūnu un molekulāros mehānismus. To izmanto arī pētījumos, kas saistīti ar brūču sadzīšanu un seruma reakciju, jo PAC2 šūnas, nonākot saskarsmē ar augšanas faktoriem, parāda izteiktas transkripcijas izmaiņas. PAC2 daudzpusība un unikālās īpašības padara to par būtisku rīku zebrafisku pētījumu attīstīšanai un salīdzinošiem pētījumiem starp mugurkaulnieku modeļiem.

Audums
Embrijs
Sinonīmi
  • PAC-2

02Klasifikācija

Organisms
Zebrafisks
Sekss
Nav norādīts
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Fibroblastiem līdzīgs
Šūnu tips
Fibroblasti
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
36 stundas

04Identifikatori

Atsauce
PAC2 (Cytion kataloga numurs 305489)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
7955
Cellosaurus
CVCL_5853

05Apstrāde un audzēšana

Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Disociācijas reaģents
Accutase
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
2 augļa dienas