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ASB-xIV
Gewebe
Lunge
Krankheit
Plattenepithelkarzinom der Lunge

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ASB-xIV

Cell line · Artikelnummer 400120

ASB-xIV cells, originating from a female Balb/c mouse, closely mimic large cell carcinoma that has been induced by chrysotile asbestos in mouse lung cells...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

ASB-xIV-Zellen, die von einer weiblichen Balb/c-Maus stammen, ahmen ein großzelliges Karzinom, das durch Chrysotilasbest in Lungenzellen der Maus ausgelöst wurde, genau nach. Diese Zellen sind einschichtige adhärente Zellen mit epithelialer Morphologie, was sie zu einem beispielhaften Modell für die Erforschung primärer Plattenepithelkarzinome (PSCC) macht. Aufgrund ihrer strukturellen und funktionellen Eigenschaften eignen sie sich besonders gut für detaillierte Studien über die zellulären Prozesse und pathologischen Mechanismen, die dem PSCC zugrunde liegen.

Die ASB-xIV-Zelllinie wird als "entzündeter" oder "heißer" Tumor charakterisiert, was auf ein hohes Maß an Immunzellinfiltration hindeutet und ihn für eine Immuntherapie empfänglicher macht. Diese Empfindlichkeit ist von entscheidender Bedeutung für die Verwendung von ASB-xIV-Zellen zur Bewertung der Wirksamkeit von Immun-Checkpoint-Therapien (ICT). Diese Zellen haben gezeigt, dass sie sehr gut auf solche Behandlungen ansprechen, was sie für die onkologische Forschung, die sich auf die Wirksamkeit von Immuntherapien konzentriert, von unschätzbarem Wert macht. Während Retinoide das Wachstum dieser Zellen in transplantierten Karzinomen bei Mäusen wirksam eindämmen konnten, zeigte Vitamin C keine ähnliche Wirkung. Trotz ihrer langsamen Verdopplungszeit von etwa 70 Stunden wachsen ASB-xIV-Zellen robust und stabil, was für die Etablierung konsistenter und zuverlässiger In-vitro-Kulturen, die für die experimentelle Reproduzierbarkeit erforderlich sind, von entscheidender Bedeutung ist.

Gewebe
Lunge
Krankheit
Plattenepithelkarzinom der Lunge

02Klassifizierung

Organismus
Maus
Sex
Nicht näher bezeichnet
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Tumorauslösend
Ja, in Balb/c-Mäusen
Verdopplungszeit
70 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
ASB-xIV (Cytion-Katalognummer 400120)
NCBI-Steuer-ID
10090
Cellosaurus
CVCL_5686

05Expression und Anfälligkeit

Viren
MAP-Test: Negativ (Sendai, Ektromelie, Polyoma, K-Virus, Kilham, Reo 3, PVM, LCM, M.pulmonis, MVM, Theiler's GD VII, Toolan's H-1, MHV, LDV, RCV/SDA, M-Adenovirus, B.piliformis).

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
Eine Aussaatdichte von 1 x 104 Zellen/cm2 wird empfohlen.
Flüssigkeitswechsel
Alle 3 bis 5 Tage
Erholung nach dem Auftauen
Lassen Sie die Zellen mindestens 24 bis 48 Stunden lang anhaften.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
Erwachsener