Mine otse sisu juurde
ASB-xIV
Kude
Kopsud
Haigus
Kopsu koldekartsinoom

Dokumendid

ASB-xIV

Cell line · Toote number 400120

ASB-xIV cells, originating from a female Balb/c mouse, closely mimic large cell carcinoma that has been induced by chrysotile asbestos in mouse lung cells...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

ASB-xIV rakud, mis pärinevad Balb/c-hiirtest, jäljendavad suurrakulist kartsinoomi, mis on tekitatud krüsotiilasbestiga hiirte kopsurakkudes. Need rakud on epiteeli morfoloogiaga monokihiliselt kleepuvad, mis teeb neist eeskujuliku mudeli primaarse plaatinakartsinoomi (PSCC) uurimiseks. Nende struktuuriliste ja funktsionaalsete omaduste tõttu sobivad nad eriti hästi PSCC aluseks olevate rakuprotsesside ja patoloogiliste mehhanismide üksikasjalikeks uuringuteks.

ASB-xIV rakuliini iseloomustab "põletikuline" või "kuum" kasvaja, mis viitab suurele immuunsüsteemi rakkude infiltratsioonile, mis muudab selle immuunravi suhtes tundlikumaks. See tundlikkus on keskse tähtsusega ASB-xIV rakkude kasutamisel immuunsüsteemi kontrollpunktiravi (ICT) tõhususe hindamiseks. Need rakud on näidanud märkimisväärset reageerimist sellistele ravimeetoditele, mis muudab nad hindamatuks immunoteraapia tõhususele keskendunud onkoloogilistes uuringutes. Lisaks sellele on retinoidid olnud tõhusad nende rakkude kasvu pidurdamisel hiirte siirdatud kantsinoomides, kuid C-vitamiin ei ole sarnast mõju avaldanud. Hoolimata aeglasest kahekordistumisaegadest (umbes 70 tundi), on ASB-xIV rakkude kasv tugev ja stabiilne, mis on oluline katsete reprodutseeritavuse tagamiseks vajalike järjepidevate ja usaldusväärsete in vitro kultuuride loomiseks.

Kude
Kopsud
Haigus
Kopsu koldekartsinoom

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Määratlemata
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, Balb/c hiirtel
Kahekordistumisaeg
70 tundi

04Tunnused

Viide
ASB-xIV (Cytioni katalooginumber 400120)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_5686

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Viirused
MAP-test: Negatiivne (Sendai, Ektromelie, Polyoma, K-Virus, Kilham, Reo 3, PVM, LCM, M.pulmonis, MVM, Theileri GD VII, Toolani H-1, MHV, LDV, RCV/SDA, M-Adenoviirus, B.piliformis).

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
Soovitatav külvitihedus on 1 x 104 rakku/cm2.
Vedeliku vahetus
Iga 3 kuni 5 päeva tagant
Taastumine pärast sulamist
Laske rakkudel vähemalt 24 kuni 48 tundi kleepuda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
Täiskasvanud