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ASB-xIV
Tecido
Pulmão
Doença
Carcinoma espinocelular pulmonar

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ASB-xIV

Cell line · Número do produto 400120

ASB-xIV cells, originating from a female Balb/c mouse, closely mimic large cell carcinoma that has been induced by chrysotile asbestos in mouse lung cells...

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1

01Informações gerais

Descrição

As células ASB-xIV, provenientes de uma fêmea de ratinho Balb/c, imitam de perto o carcinoma de células grandes que foi induzido pelo amianto crisótilo em células pulmonares de ratinho. Estas células são aderentes a uma monocamada com uma morfologia epitelial, posicionando-as como um modelo exemplar para a investigação do carcinoma primário de células escamosas (PSCC). As suas caraterísticas estruturais e funcionais tornam-nas particularmente adequadas para estudos pormenorizados sobre os processos celulares e os mecanismos patológicos subjacentes ao CECP.

A linha celular ASB-xIV é caracterizada como um tumor "inflamado" ou "quente", indicando um elevado grau de infiltração de células imunitárias, o que a torna mais sensível à imunoterapia. Esta sensibilidade é fundamental na utilização das células ASB-xIV para avaliar a eficácia das terapias de pontos de controlo imunitário (ICT). Estas células demonstraram uma reatividade significativa a estes tratamentos, o que as torna inestimáveis na investigação oncológica centrada na eficácia imunoterapêutica. Além disso, embora os retinóides tenham sido eficazes na contenção do crescimento destas células em carcinomas transplantados em ratinhos, a vitamina C não conseguiu produzir um efeito semelhante. Apesar do seu lento tempo de duplicação de aproximadamente 70 horas, as células ASB-xIV mantêm um crescimento robusto e estável, o que é crucial para estabelecer culturas in vitro consistentes e fiáveis, necessárias para a reprodutibilidade experimental.

Tecido
Pulmão
Doença
Carcinoma espinocelular pulmonar

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Não especificado
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tumorigénico
Sim, no rato Balb/c
Tempo de duplicação
70 horas

04Identificadores

Referência
ASB-xIV (número de catálogo Cytion 400120)
Número de identificação fiscal do NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5686

05Expressão e suscetibilidade

Vírus
Teste MAP: Negativo (Sendai, Ektromelie, Polyoma, K-Virus, Kilham, Reo 3, PVM, LCM, M.pulmonis, MVM, Theiler's GD VII, Toolan's H-1, MHV, LDV, RCV/SDA, M-Adenovirus, B.piliformis).

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
Recomenda-se uma densidade de semeadura de 1 x 104 células/cm2.
Renovação de fluidos
A cada 3 a 5 dias
Recuperação após o descongelamento
Deixar as células aderirem durante, pelo menos, 24 a 48 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
Adulto