Siirry sisältöön
ASB-xIV
Kudos
Keuhkot
Sairaus
Keuhkojen okasolusyöpä

Asiakirjat

ASB-xIV

Cell line · Tuotenumero 400120

ASB-xIV cells, originating from a female Balb/c mouse, closely mimic large cell carcinoma that has been induced by chrysotile asbestos in mouse lung cells...

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

Balb/c-hiiren naaraasta peräisin olevat ASB-xIV-solut jäljittelevät tarkasti hiiren keuhkosolujen krysotiiliasbestin aiheuttamaa suurisoluista karsinoomaa. Nämä solut ovat yksikerroksisia ja epiteelimorfologialtaan tarttuvia, mikä tekee niistä esimerkillisen mallin primaarisen okasolusyövän (PSCC) tutkimukseen. Niiden rakenteellisten ja toiminnallisten ominaisuuksien vuoksi ne soveltuvat erityisen hyvin PSCC:n taustalla olevien soluprosessien ja patologisten mekanismien yksityiskohtaisiin tutkimuksiin.

ASB-xIV-solulinjaa luonnehditaan "tulehtuneeksi" tai "kuumaksi" kasvaimeksi, mikä viittaa siihen, että se on hyvin immuunisolujen infiltroima, mikä tekee siitä immunoterapiaan herkemmän. Tämä herkkyys on ratkaisevan tärkeää, kun ASB-xIV-soluja käytetään immuunitarkistuspistehoitojen (ICT) tehokkuuden arvioinnissa. Nämä solut ovat osoittaneet merkittävää reagointikykyä tällaisiin hoitoihin, mikä tekee niistä korvaamattomia immunoterapian tehoon keskittyvässä onkologisessa tutkimuksessa. Lisäksi retinoidit ovat hillinneet tehokkaasti näiden solujen kasvua hiirille siirretyissä karsinoomissa, mutta C-vitamiinilla ei ole ollut vastaavaa vaikutusta. Vaikka ASB-xIV-solut kaksinkertaistuvat hitaasti, noin 70 tuntia, niiden kasvu on vankkaa ja vakaata, mikä on ratkaisevan tärkeää, jotta voidaan luoda johdonmukaisia ja luotettavia in vitro -viljelmiä, jotka ovat välttämättömiä kokeellisen toistettavuuden kannalta.

Kudos
Keuhkot
Sairaus
Keuhkojen okasolusyöpä

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Määrittelemätön
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, Balb/c-hiirissä
Kaksinkertaistumisaika
70 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
ASB-xIV (Cytionin luettelonumero 400120)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_5686

05Ilmentyminen ja alttius

Virukset
MAP-testi: Negatiivinen (Sendai, Ektromelie, Polyoma, K-virus, Kilham, Reo 3, PVM, LCM, M.pulmonis, MVM, Theilerin GD VII, Toolanin H-1, MHV, LDV, RCV/SDA, M-Adenovirus, B.piliformis).

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
Suositeltava siemen tiheys on 1 x 104 solua/cm2.
Nesteen uusiminen
3-5 päivän välein
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Anna solujen tarttua vähintään 24-48 tuntia.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
Aikuiset