Pāriet uz saturu
ASB-xIV
Audums
Plaušas
Slimība
Plaušu plakanšūnu karcinoma

Dokumenti

ASB-xIV

Cell line · Preces numurs 400120

ASB-xIV cells, originating from a female Balb/c mouse, closely mimic large cell carcinoma that has been induced by chrysotile asbestos in mouse lung cells...

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

ASB-xIV šūnas, kas iegūtas no Balb/c peles mātītes, precīzi imitē lielo šūnu karcinomu, ko peļu plaušu šūnās izraisīja krizotila azbests. Šīm šūnām ir vienslāņa adhēzija ar epitēlija morfoloģiju, kas tās padara par paraugu primārās plakanšūnu karcinomas (PPLK) pētījumiem. To strukturālās un funkcionālās īpašības padara tās īpaši piemērotas detalizētiem pētījumiem par šūnu procesiem un patoloģiskajiem mehānismiem, kas ir PSCC pamatā.

ASB-xIV šūnu līniju raksturo kā "iekaisušu" jeb "karstu" audzēju, kas norāda uz augstu imūnšūnu infiltrācijas pakāpi, kas to padara jutīgāku pret imūnterapiju. Šī jutība ir izšķiroša, izmantojot ASB-xIV šūnas, lai novērtētu imūnsistēmas kontrolpunktu terapijas (ICT) efektivitāti. Šīs šūnas ir pierādījušas ievērojamu atsaucību uz šādu ārstēšanu, padarot tās nenovērtējamas onkoloģiskajos pētījumos, kas vērsti uz imūnterapijas efektivitāti. Turklāt, lai gan retinoīdi ir efektīvi ierobežojuši šo šūnu augšanu transplantētās kanceromās pelēm, C vitamīns nav radījis līdzīgu efektu. Neskatoties uz to lēno dubultošanās laiku, kas ir aptuveni 70 stundas, ASB-xIV šūnas saglabā spēcīgu un stabilu augšanu, kas ir ļoti svarīgi, lai izveidotu konsekventas un uzticamas in vitro kultūras, kas nepieciešamas eksperimentālai atkārtojamībai.

Audums
Plaušas
Slimība
Plaušu plakanšūnu karcinoma

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Nav norādīts
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Tumorogēns
Jā, Balb/c pelēm
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
70 stundas

04Identifikatori

Atsauce
ASB-xIV (Cytion kataloga numurs 400120)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_5686

05Pazīmes un uzņēmība

Vīrusi
MAP tests: (Sendai, Ektromelie, Polyoma, K-Virus, Kilham, Reo 3, PVM, LCM, M.pulmonis, MVM, Theiler's GD VII, Toolan's H-1, MHV, LDV, RCV/SDA, M-Adenovirus, B.piliformis).

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
Ieteicamā sēšanas blīvums ir 1 x 104 šūnas/cm2.
Šķidruma atjaunošana
Ik pēc 3 līdz 5 dienām
Atgūšanās pēc atkusņa
Ļaujiet šūnām salipt vismaz 24-48 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
Pieaugušo