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LC-540
Gewebe
Hoden
Krankheit
Adenom
Synonyme
LC540, LC 540

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LC-540

Cell line · Artikelnummer 500262

The LC-540 cell line is an adherent cell model derived from an adult male Fischer rat. Known for its robust growth properties, this cell line has a modal ...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie LC-540 ist ein adhärentes Zellmodell, das von einer erwachsenen männlichen Fischer-Ratte stammt. Diese Zelllinie, die für ihre robusten Wachstumseigenschaften bekannt ist, hat eine modale Chromosomenzahl von 42 mit einem karyotypischen Bereich von 40 bis 43. Etwa 21 % der Zellen weisen eine Aneuploidie auf, obwohl keine anderen strukturellen Anomalien gemeldet wurden, was auf ein relativ stabiles genomisches Profil hinweist.

LC-540-Zellen sind tumorigen, d. h. sie sind in der Lage, Tumore zu bilden, wenn sie in Ratten eingeführt werden. Diese Eigenschaft macht sie besonders wertvoll für die Untersuchung der Onkogenese und Tumorbiologie in einer kontrollierten In-vitro-Umgebung. Darüber hinaus sind diese Zellen für verschiedene Viren empfänglich, darunter das Herpes-simplex-Virus, das Vaccinia-Virus, das Virus der vesikulären Stomatitis und das humane Poliovirus 1. Diese Anfälligkeit macht LC-540 zu einem nützlichen Modell für die virologische Forschung, insbesondere für die Erforschung von Virus-Wirt-Interaktionen, viraler Pathogenese und der Entwicklung antiviraler Strategien.

Aufgrund ihrer spezifischen Eigenschaften sind LC-540-Zellen für eine Reihe von Forschungsanwendungen von Bedeutung, darunter die Krebsforschung und die Virologie, wo sie Einblicke in die Mechanismen der Tumorbildung und der Virusinfektionen geben.

Gewebe
Hoden
Krankheit
Adenom
Synonyme
  • LC540
  • LC 540

02Klassifizierung

Organismus
Ratte
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Zelltyp
Leydig
Tumorauslösend
Ja, bei Ratten

04Bezeichner

Quellenangabe
LC-540 (Cytion-Katalognummer 500262)
NCBI-Steuer-ID
10116
Cellosaurus
CVCL_3536

05Expression und Anfälligkeit

Reverse Transkriptase
Positiv
Produkte
Steroidhormone, Östrogene (Östradiol und andere), Androgene (Testosteron und andere)

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion-Artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS und 1% NEAA
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
1 bis 2 x 106 Zellen/cm2
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 5 x 104 Zellen/cm² ausplattieren und die Zellen mindestens 24 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen und adhärieren lassen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Rasse / Unterart
Fischer
Alter des Spenders
Erwachsener