Siirry sisältöön
LC-540
Kudos
Kivekset
Sairaus
Adenooma
Synonyymit
LC540, LC 540

Asiakirjat

LC-540

Cell line · Tuotenumero 500262

The LC-540 cell line is an adherent cell model derived from an adult male Fischer rat. Known for its robust growth properties, this cell line has a modal ...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa vähän
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

LC-540-solulinja on aikuisesta urospuolisesta Fischer-rotasta peräisin oleva tarttuva solumalli. Tämän vankoista kasvuominaisuuksistaan tunnetun solulinjan modaalinen kromosomiluku on 42 ja karyotyyppinen vaihteluväli 40-43. Noin 21 prosentissa soluista esiintyy aneuploidiaa, mutta muita rakenteellisia poikkeavuuksia ei ole raportoitu, mikä viittaa suhteellisen vakaaseen genomiprofiiliin.

LC-540-solut ovat tumorigeenisiä, ja ne kykenevät muodostamaan kasvaimia, kun ne viedään rotille. Tämä ominaisuus tekee niistä erityisen arvokkaita onkogeneesin ja kasvainten biologian tutkimiseen kontrolloidussa in vitro -ympäristössä. Lisäksi nämä solut ovat alttiita useille viruksille, kuten Herpes simplex -virukselle, Vaccinia-virukselle, Vesicular stomatitis -virukselle ja Human poliovirus 1:lle. Tämä alttius tekee LC-540:stä hyödyllisen mallin virologiseen tutkimukseen, erityisesti viruksen ja isännän vuorovaikutuksen, viruspatogeneesin ja viruksen vastaisten strategioiden kehittämisen tutkimiseen.

Erityisominaisuuksiensa vuoksi LC-540-solut ovat tärkeitä monissa tutkimussovelluksissa, kuten syöpätutkimuksessa ja virologiassa, joissa ne tarjoavat tietoa kasvainten muodostumisen ja virusinfektioiden mekanismeista.

Kudos
Kivekset
Sairaus
Adenooma
Synonyymit
  • LC540
  • LC 540

02Luokittelu

Organismi
Rotta
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Solutyyppi
Leydig
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, rotilla

04Tunnisteet

Lähdeviite
LC-540 (Cytionin luettelonumero 500262)
NCBI-verotunnus
10116
Cellosaurus
CVCL_3536

05Ilmentyminen ja alttius

Käänteiskopioijaentsyymi
Positiivinen
Tuotteet
Steroidihormoni, estrogeeni (estradioli ja muut), androgeeni (testosteroni ja muut)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1–2 x 106 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
Fischer
Luovuttajan ikä
Aikuiset