Mine otse sisu juurde
LC-540
Kude
Testis
Haigus
Adenoom
Sünonüümid
LC540, LC 540

Dokumendid

LC-540

Cell line · Toote number 500262

The LC-540 cell line is an adherent cell model derived from an adult male Fischer rat. Known for its robust growth properties, this cell line has a modal ...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Varud on väikesed
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
1

01Üldine teave

Kirjeldus

LC-540 rakuliin on täiskasvanud isase Fischeri roti adherentsete rakkude mudel. See rakuliin on tuntud oma tugevate kasvuomaduste poolest ja selle modaalne kromosoomiarv on 42, karyotüüpide vahemik on 40 kuni 43. Ligikaudu 21% rakkudest on aneuploidsed, kuigi muudest struktuurilistest kõrvalekalletest ei ole teatatud, mis viitab suhteliselt stabiilsele genoomiprofiilile.

LC-540 rakud on tuumorigeensed ja suudavad rottidesse viimisel moodustada kasvajaid. See omadus muudab nad eriti väärtuslikuks onkogeneesi ja kasvajate bioloogia uurimiseks kontrollitud in vitro keskkonnas. Lisaks on need rakud vastuvõtlikud mitmetele viirustele, sealhulgas Herpes simplex'i viirusele, Vaccinia viirusele, Vesicular stomatitis virus ja Human poliovirus 1. Selline vastuvõtlikkus muudab LC-540 kasulikuks mudeliks viroloogilistes uuringutes, eriti viiruse ja peremehe vastastikmõjude, viiruse patogeneesi ja viirusevastaste strateegiate väljatöötamise uurimiseks.

Tänu oma spetsiifilistele omadustele on LC-540 rakud olulised mitmesugustes teadusuuringutes, sealhulgas vähiuuringutes ja viroloogias, kus nad annavad ülevaate kasvajate tekkimise ja viirusinfektsioonide mehhanismidest.

Kude
Testis
Haigus
Adenoom
Sünonüümid
  • LC540
  • LC 540

02Klassifikatsioon

Organism
Rott
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Rakutüüp
Leydig
Tuumorigeenne
Jah, rottidel

04Tunnused

Viide
LC-540 (Cytioni katalooginumber 500262)
NCBI maksukood
10116
Cellosaurus
CVCL_3536

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Pöördtranskriptaas
Positiivne
Tooted
Steroidhormoon, östrogeen (östradiool jt), androgeen (testosteroon jt)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 kuni 2 x 106 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
Fischer
Doonori vanus
Täiskasvanud