Pāriet uz saturu
LC-540
Audums
Testis
Slimība
Adenoma
Sinonīmi
LC540, LC 540

Dokumenti

LC-540

Cell line · Preces numurs 500262

The LC-540 cell line is an adherent cell model derived from an adult male Fischer rat. Known for its robust growth properties, this cell line has a modal ...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Neliels krājums
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

LC-540 šūnu līnija ir adherēts šūnu modelis, kas iegūts no pieaugušiem Fišera žurku tēviņiem. Šai šūnu līnijai, kas pazīstama ar savām spēcīgām augšanas īpašībām, ir 42 hromosomu modālais skaits ar kariotipisko diapazonu no 40 līdz 43 hromosomām. Aptuveni 21 % šūnu ir aneuploīdijas, lai gan nav ziņots par citām strukturālām anomālijām, kas norāda uz relatīvi stabilu genoma profilu.

LC-540 šūnas ir tumorogēnas, un, ievadot žurkām, tās spēj veidot audzējus. Šī īpašība padara tās īpaši vērtīgas onkoģenēzes un audzēju bioloģijas pētījumiem kontrolētā in vitro vidē. Turklāt šīs šūnas ir uzņēmīgas pret vairākiem vīrusiem, tostarp Herpes simplex vīrusu, Vaccinia vīrusu, vezikulārā stomatīta vīrusu un cilvēka poliovīrusu 1. vīrusu. Šī uzņēmība padara LC-540 par noderīgu modeli virusoloģiskiem pētījumiem, jo īpaši vīrusa un saimnieka mijiedarbības, vīrusu patoģenēzes un pretvīrusu stratēģiju izstrādē.

LC-540 šūnas to specifisko īpašību dēļ ir noderīgas dažādos pētījumos, tostarp vēža izpētē un virusoloģijā, kur tās ļauj izprast audzēju veidošanās un vīrusu infekciju mehānismus.

Audums
Testis
Slimība
Adenoma
Sinonīmi
  • LC540
  • LC 540

02Klasifikācija

Organisms
Žurka
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Šūnu tips
Leidiga
Tumorogēns
Jā, žurkām

04Identifikatori

Atsauce
LC-540 (Cytion kataloga numurs 500262)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10116
Cellosaurus
CVCL_3536

05Pazīmes un uzņēmība

Reversā transkriptāze
Pozitīvs
Produkti
Steroīdu hormons, estrogēns (estradiols un citi), androgēns (testosterons un citi)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 līdz 2 x 106 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
Fischer
Donora vecums
Pieaugušo