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LC-540
Tessuto
Testicolo
Malattia
Adenoma
Sinonimi
LC540, LC 540

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LC-540

Cell line · Codice prodotto 500262

The LC-540 cell line is an adherent cell model derived from an adult male Fischer rat. Known for its robust growth properties, this cell line has a modal ...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare LC-540 è un modello cellulare aderente derivato da un ratto Fischer maschio adulto. Nota per le sue robuste proprietà di crescita, questa linea cellulare ha un numero cromosomico modale di 42, con un intervallo cariotipico compreso tra 40 e 43. Circa il 21% delle cellule presenta aneuploidia, ma non sono state segnalate altre anomalie strutturali. Circa il 21% delle cellule presenta aneuploidie, anche se non sono state segnalate altre anomalie strutturali, il che indica un profilo genomico relativamente stabile.

Le cellule LC-540 sono tumorigeniche, con la capacità di formare tumori quando vengono introdotte nei ratti. Questa caratteristica le rende particolarmente preziose per lo studio dell'oncogenesi e della biologia tumorale in un ambiente controllato in vitro. Inoltre, queste cellule sono sensibili a diversi virus, tra cui l'Herpes simplex virus, il Vaccinia virus, il virus della stomatite vescicolare e il poliovirus 1 umano. Questa suscettibilità rende le LC-540 un modello utile per la ricerca virologica, in particolare per esplorare le interazioni virus-ospite, la patogenesi virale e lo sviluppo di strategie antivirali.

Grazie alle loro caratteristiche specifiche, le cellule LC-540 sono utili in una serie di applicazioni di ricerca, tra cui la ricerca sul cancro e la virologia, dove forniscono approfondimenti sui meccanismi di formazione dei tumori e delle infezioni virali.

Tessuto
Testicolo
Malattia
Adenoma
Sinonimi
  • LC540
  • LC 540

02Classificazione

Organismo
Ratto
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Tipo di cellula
Leydig
Tumorigenico
Sì, nei ratti

04Identificatori

Riferimento bibliografico
LC-540 (numero di catalogo Cytion 500262)
Codice fiscale NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_3536

05Espressione e suscettibilità

Trascriptasi inversa
Positivo
Prodotti
Ormone steroideo, estrogeno (estradiolo e altri), androgeno (testosterone e altri)

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS e l'1% di NEAA
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
Da 1 a 2 x 106 cellule/cm2
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 24 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Razza / sottospecie
Fischer
Età dei donatori
Adulti