Přejít na obsah
LC-540
Tkáň
Testis
Nemoc
Adenom
Synonyma
LC540, LC 540

Dokumenty

LC-540

Cell line · Číslo výrobku 500262

The LC-540 cell line is an adherent cell model derived from an adult male Fischer rat. Known for its robust growth properties, this cell line has a modal ...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Nízký stav zásob
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie LC-540 je adherentní buněčný model získaný z dospělých samců potkana Fischera. Tato buněčná linie, známá svými robustními růstovými vlastnostmi, má modální počet chromozomů 42 s karyotypickým rozsahem 40 až 43. Přibližně 21 % buněk vykazuje aneuploidii, ačkoli nebyly zaznamenány žádné jiné strukturální abnormality, což svědčí o relativně stabilním genomickém profilu.

Buňky LC-540 jsou tumorigenní a po vnesení do organismu potkanů mají schopnost vytvářet nádory. Tato vlastnost je činí zvláště cennými pro studium onkogeneze a biologie nádorů v kontrolovaném prostředí in vitro. Kromě toho jsou tyto buňky citlivé na několik virů, včetně viru Herpes simplex, viru Vaccinia, viru vezikulární stomatitidy a lidského polioviru 1. Tato citlivost činí z LC-540 užitečný model pro virologický výzkum, zejména při zkoumání interakcí mezi virem a hostitelem, virové patogeneze a vývoje antivirových strategií.

Díky svým specifickým vlastnostem jsou buňky LC-540 užitečné v řadě výzkumných aplikací, včetně výzkumu rakoviny a virologie, kde umožňují nahlédnout do mechanismů vzniku nádorů a virových infekcí.

Tkáň
Testis
Nemoc
Adenom
Synonyma
  • LC540
  • LC 540

02Klasifikace

Organismus
Krysa
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Typ buňky
Leydig
Tumorogenní
Ano, u krys

04Identifikátory

Citace
LC-540 (katalogové číslo Cytion 500262)
Daňové identifikační číslo NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_3536

05Exprese a náchylnost

Reverzní transkriptáza
Pozitivní
Produkty
Steroidní hormon, estrogen (estradiol a další), androgen (testosteron a další)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS (číslo článku Cytion 820100a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS a 1 % NEAA
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 až 2 x 106 buněk/cm2
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Plemeno / poddruh
Fischer
Věk dárce
Dospělí