Ir diretamente para o conteúdo
LC-540
Tecido
Testículo
Doença
Adenoma
Sinónimos
LC540, LC 540

Documentos

LC-540

Cell line · Número do produto 500262

The LC-540 cell line is an adherent cell model derived from an adult male Fischer rat. Known for its robust growth properties, this cell line has a modal ...

€430.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

Estoque reduzido
Lote
Recomendado (lote mais recente)
1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular LC-540 é um modelo de células aderentes derivado de um rato Fischer macho adulto. Conhecida pelas suas propriedades de crescimento robustas, esta linha celular tem um número cromossómico modal de 42, com um intervalo cariotípico de 40 a 43. Cerca de 21% das células apresentam aneuploidia, embora não tenham sido registadas outras anomalias estruturais, o que indica um perfil genómico relativamente estável.

As células LC-540 são tumorigénicas, com a capacidade de formar tumores quando introduzidas em ratos. Esta caraterística torna-as particularmente valiosas para o estudo da oncogénese e da biologia tumoral num ambiente in vitro controlado. Além disso, estas células são susceptíveis a vários vírus, incluindo o vírus Herpes simplex, o vírus Vaccinia, o vírus da estomatite vesicular e o poliovírus humano 1. Esta suscetibilidade torna a LC-540 um modelo útil para a investigação virológica, em especial para explorar as interações vírus-hospedeiro, a patogénese viral e o desenvolvimento de estratégias antivirais.

Devido às suas caraterísticas específicas, as células LC-540 são fundamentais para uma série de aplicações de investigação, incluindo a investigação do cancro e a virologia, onde fornecem informações sobre os mecanismos de formação de tumores e infecções virais.

Tecido
Testículo
Doença
Adenoma
Sinónimos
  • LC540
  • LC 540

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Tipo de célula
Leydig
Tumorigénico
Sim, em ratos

04Identificadores

Referência
LC-540 (número de catálogo Cytion 500262)
Número de identificação fiscal do NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_3536

05Expressão e suscetibilidade

Transcriptase reversa
Positivo
Produtos
Hormona esteroide, estrogénio (estradiol e outros), androgénio (testosterona e outros)

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
EMEM (MEM Eagle), com: 2 mM L-Glutamina, com: 2,2 g/L NaHCO3, com: EBSS (número de artigo Cytion 820100a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS e 1% de NEAA
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
1 a 2 x 106 células/cm2
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento
Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 5 x 104 células/cm² e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 24 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Raça / subespécie
Fischer
Idade do dador
Adulto