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WERI-Rb-1
Gewebe
Auge
Krankheit
Retinoblastom
Synonyme
WERI-RB-1, WERI-Rb 1, WERI-Rb1, WERI-RB1, WERI Rb-1, WERIRb1, WERI, Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1

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WERI-Rb-1

Cell line · Artikelnummer 300632

The WERI-Rb-1 cell line is derived from a retinoblastoma, a rare malignant tumor of the retina that typically manifests in early childhood. This cell line...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie WERI-Rb-1 stammt von einem Retinoblastom, einem seltenen bösartigen Tumor der Netzhaut, der typischerweise in der frühen Kindheit auftritt. Diese Zelllinie wurde entwickelt, um ein konsistentes und reproduzierbares Modell für die Untersuchung der Biologie des Retinoblastoms zu schaffen, das Einblicke in die genetischen, molekularen und zellulären Mechanismen bietet, die dieser Form von Krebs zugrunde liegen. WERI-Rb-1-Zellen werden in der onkologischen Forschung besonders geschätzt, da sie für die Untersuchung der pathophysiologischen Prozesse und potenzieller therapeutischer Ziele für das Retinoblastom nützlich sind.

WERI-Rb-1-Zellen weisen typische Merkmale des Retinoblastoms auf, darunter die Expression neuronaler Marker und die Fähigkeit, Zellaggregate zu bilden, die Flexner-Wintersteiner-Rosetten ähneln, einem Kennzeichen der Histologie des Retinoblastoms. Diese Zellen wurden ausgiebig genutzt, um die Rolle von Onkogenen und Tumorsuppressorgenen bei der Krebsentwicklung zu untersuchen, wobei der Schwerpunkt auf dem RB1-Gen lag, dessen Mutationen bei der Entstehung des Retinoblastoms eine zentrale Rolle spielen. Darüber hinaus dient WERI-Rb-1 als wichtiges Instrument zur Evaluierung von Chemotherapeutika und neuartigen Medikamentenverabreichungssystemen, die die Behandlungsergebnisse für Retinoblastom-Patienten verbessern sollen.

Gewebe
Auge
Krankheit
Retinoblastom
Anwendungen
3D-Zellkultur
Synonyme
  • WERI-RB-1
  • WERI-Rb 1
  • WERI-Rb1
  • WERI-RB1
  • WERI Rb-1
  • WERIRb1
  • WERI
  • Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Aussetzung
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Runde Zellen
Tumorauslösend
Ja, bei Kaninchen
Karyotyp
Menschlicher pseudodiploider Karyotyp mit 3.9% Polyploidie - 46(41-48)<2n>xx, +6, -10, -10, -14, -22, +3mar, add(3)(q25), add(3)(q25), add(4)(p15), add(5)(q35), i(6q), del(7)(p21), add(9)(q33), der(13)x2, add(16)(q23), add(16)(q23), i(17q), add(19)(q13) - offenbar (uniparental?) disomic rearrangement of ch 13 - entspricht dem gemeldeten Karyotyp

04Bezeichner

Quellenangabe
WERI-Rb-1 (Cytion Katalognummer 300632)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1792

05Expression und Anfälligkeit

Isoenzyme
ES-D, 1, G6PD, B, GLO-I, 2, Me-2, 1, PGM1, 1, PGM3, 0
Viren
EBV -, HBV -, HCV -, HHV-8 -, HIV-1 -, HIV-2 -, HTLV-1/2 -, MLV -, SMRV -
Reverse Transkriptase
Negativ

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS und 0,01 mg/mL Insulin
Subkultivierung
Homogenisieren Sie die Zellsuspension im Kolben vorsichtig durch Auf- und Abpipettieren und entnehmen Sie dann eine repräsentative Probe, um die Zelldichte pro ml zu bestimmen. Verdünnen Sie die Suspension mit frischem Kulturmedium auf eine Zellkonzentration von 1 x 105 Zellen/ml und füllen Sie die angepasste Suspension zur weiteren Kultivierung in neue Kolben.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir 50 % Basalmedium + 40 % FBS + 10 % DMSO oder CM-1 (Cytion-Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektiva und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und den kryoinduzierten Stress zu verringern.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
1 Jahr