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WEHI-164
Krankheit
Fibrosarkom
Synonyme
WEHI 164, WEHI164, WEHI 164 TC

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WEHI-164

Cell line · Artikelnummer 400438

The WEHI-164 cell line was originally established from a fibrosarcoma that developed in a BALB/c mouse following subcutaneous injections of 3-methylcholan...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie WEHI-164 wurde ursprünglich aus einem Fibrosarkom entwickelt, das sich in einer BALB/c-Maus nach subkutaner Injektion von 3-Methylcholanthren entwickelte. Diese Zelllinie stammt aus mesenchymalem Gewebe und weist typische Merkmale von fibroblastenähnlichen Zellen auf. WEHI-164 ist ein wichtiges Instrument bei der Erforschung von Krebs, das vor allem auf dem Gebiet der Tumorimmunologie und der zellulären Mechanismen der Apoptose Erkenntnisse liefert.

WEHI-164-Zellen werden in der Forschung besonders geschätzt, weil sie auf die durch Zytokine ausgelöste Apoptose ansprechen und damit ein wichtiges Modell für die Untersuchung der Wechselwirkung zwischen Zytokinen und Krebszellen darstellen. Diese Empfindlichkeit gegenüber Zytokinen wie dem Tumor-Nekrose-Faktor (TNF) und TRAIL (TNF-related apoptosis-inducing ligand) macht die WEHI-164-Zelllinie zu einer nützlichen Ressource für die Erforschung von Signalwegen, die den Zelltod vermitteln, und für das Screening potenzieller Krebstherapien, die diese Wege manipulieren könnten. Darüber hinaus ermöglichen die fibroblastenähnlichen Eigenschaften der Zelllinie Studien zur Zellmorphologie, zu Wachstumseigenschaften und zur Mikroumgebung des Tumors, was ein umfassenderes Verständnis der Tumordynamik und der Interaktionen innerhalb der Zellmatrix ermöglicht.

Trotz ihrer umfangreichen Verwendung in der Forschung weist die Zelllinie WEHI-164 mehrere Chromosomenaberrationen auf, was bei Zellen, die durch chemische Karzinogenese transformiert wurden, üblich ist. Diese genetischen Instabilitäten sind entscheidend für Studien, die darauf abzielen zu verstehen, wie genetische Variationen das Fortschreiten von Krebs und die Reaktion auf Behandlungen beeinflussen können. Die fortlaufende Verwendung von WEHI-164 in verschiedenen Forschungskonzepten unterstreicht seinen Nutzen für die Erweiterung des Wissens über die Krebsbiologie und die Entwicklung neuer therapeutischer Ansätze.

Krankheit
Fibrosarkom
Synonyme
  • WEHI 164
  • WEHI164
  • WEHI 164 TC

02Klassifizierung

Organismus
Maus
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Fibroblastenähnlich
Zelltyp
Fibroblasten
Tumorauslösend
Ja, bei Balb/c-Mäusen

04Bezeichner

Quellenangabe
WEHI-164 (Cytion Katalognummer 400438)
NCBI-Steuer-ID
10090
Cellosaurus
CVCL_2251

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
1 x 104 Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 5 x 104 Zellen/cm² ausplattieren und die Zellen mindestens 48 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen und anhaften lassen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Rasse / Unterart
BALB/c