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WEHI-164
Doença
Fibrossarcoma
Sinónimos
WEHI 164, WEHI164, WEHI 164 TC

Documentos

WEHI-164

Cell line · Número do produto 400438

The WEHI-164 cell line was originally established from a fibrosarcoma that developed in a BALB/c mouse following subcutaneous injections of 3-methylcholan...

€430.00sem impostos nem portes de envio

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular WEHI-164 foi originalmente estabelecida a partir de um fibrossarcoma que se desenvolveu num ratinho BALB/c após injecções subcutâneas de 3-metilcolantreno. Esta linha celular é derivada de tecido mesenquimal e apresenta caraterísticas típicas de células semelhantes a fibroblastos. A WEHI-164 tem sido um instrumento fundamental no estudo do cancro, fornecendo conhecimentos, em particular, nos domínios da imunologia tumoral e dos mecanismos celulares da apoptose.

As células WEHI-164 são especialmente valorizadas na investigação devido à sua capacidade de resposta à apoptose induzida por citocinas, o que as torna um modelo importante para o estudo da interação entre citocinas e células cancerosas. Esta sensibilidade a citocinas como o fator de necrose tumoral (TNF) e o TRAIL (ligando indutor de apoptose relacionado com o TNF) coloca a linha celular WEHI-164 como um recurso útil para explorar as vias de sinalização que medeiam a morte celular e para o rastreio de potenciais terapias anticancerígenas que possam manipular essas vias. Além disso, as propriedades semelhantes às dos fibroblastos da linha celular permitem estudos sobre a morfologia celular, as caraterísticas de crescimento e o microambiente tumoral, proporcionando uma compreensão mais abrangente da dinâmica do tumor e das interações no interior da matriz celular.

Apesar da sua extensa utilização na investigação, a linha celular WEHI-164 apresenta várias aberrações cromossómicas, o que é comum nas células transformadas por carcinogénese química. Estas instabilidades genéticas são cruciais para estudos que visam compreender como as variações genéticas podem influenciar a progressão do cancro e a resposta aos tratamentos. A utilização contínua da WEHI-164 em vários contextos de investigação sublinha a sua utilidade para o avanço do conhecimento da biologia do cancro e para o desenvolvimento de novas abordagens terapêuticas.

Doença
Fibrossarcoma
Sinónimos
  • WEHI 164
  • WEHI164
  • WEHI 164 TC

02Classificação

Organismo
Rato
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Tipo fibroblastos
Tipo de célula
Fibroblastos
Tumorigénico
Sim, em ratinhos Balb/c

04Identificadores

Referência
WEHI-164 (número de catálogo Cytion 400438)
Número de identificação fiscal do NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_2251

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
1 x 104 células/cm2
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento
Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 5 x 104 células/cm² e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 48 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Raça / subespécie
BALB/c