Gå til innholdet
WEHI-164
Sykdom
Fibrosarkom
Synonymer
WEHI 164, WEHI164, WEHI 164 TC

Dokumenter

WEHI-164

Cell line · Produktnummer 400438

The WEHI-164 cell line was originally established from a fibrosarcoma that developed in a BALB/c mouse following subcutaneous injections of 3-methylcholan...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

Cellelinjen WEHI-164 ble opprinnelig etablert fra et fibrosarkom som utviklet seg i en BALB/c-mus etter subkutane injeksjoner av 3-metylkolantren. Denne cellelinjen er avledet fra mesenkymalt vev og har egenskaper som er typiske for fibroblastlignende celler. WEHI-164 har vært et viktig verktøy i studiet av kreft, og har særlig bidratt med innsikt innen tumorimmunologi og cellulære mekanismer for apoptose.

WEHI-164-celler er spesielt verdsatt i forskning på grunn av deres følsomhet for cytokinindusert apoptose, noe som gjør dem til en viktig modell for å studere samspillet mellom cytokiner og kreftceller. Denne følsomheten for cytokiner som tumornekrosefaktor (TNF) og TRAIL (TNF-relatert apoptoseinduserende ligand) gjør WEHI-164-cellelinjen til en nyttig ressurs for utforskning av signalveier som medierer celledød, og for screening av potensielle kreftbehandlinger som kan manipulere disse signalveiene. I tillegg gjør cellelinjens fibroblastlignende egenskaper det mulig å studere cellemorfologi, vekstegenskaper og tumorens mikromiljø, noe som gir en mer omfattende forståelse av tumordynamikk og interaksjoner i den cellulære matrisen.

Til tross for at WEHI-164-cellelinjen har vært mye brukt i forskning, har den flere kromosomavvik, noe som er vanlig blant celler som er transformert ved kjemisk karsinogenese. Disse genetiske ustabiliteter er avgjørende for studier som fokuserer på å forstå hvordan genetiske variasjoner kan påvirke kreftutvikling og respons på behandling. Den pågående bruken av WEHI-164 i ulike forskningsoppsett understreker hvor nyttig den er for å øke kunnskapen om kreftbiologi og for å utvikle nye behandlingsmetoder.

Sykdom
Fibrosarkom
Synonymer
  • WEHI 164
  • WEHI164
  • WEHI 164 TC

02Klassifisering

Organisme
Mus
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Fibroblastlignende
Celletype
Fibroblast
Tumorinduserende
Ja, i Balb/c-mus

04Identifikatorer

Kildehenvisning
WEHI-164 (Cytion-katalognummer 400438)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_2251

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
1 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 48 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Rase / underart
BALB/c