الانتقال إلى المحتوى
WEHI-164
المرض
الساركوما الليفية
المرادفات
WEHI 164, WEHI164, WEHI 164 TC

المستندات

WEHI-164

Cell line · رقم المنتج 400438

The WEHI-164 cell line was originally established from a fibrosarcoma that developed in a BALB/c mouse following subcutaneous injections of 3-methylcholan...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

تم إنشاء خط الخلايا WEHI-164 في الأصل من ساركوما ليفية تطورت في فأر BALB/c بعد حقن 3 ميثيل كولانثرين تحت الجلد. يُشتق هذا الخط الخلوي من نسيج اللُّحمة المتوسطة ويُظهر الخصائص النموذجية للخلايا الشبيهة بالخلايا الليفية. لطالما كانت WEHI-164 أداة بالغة الأهمية في دراسة السرطان، حيث توفر رؤى ثاقبة خاصة في مجالات علم مناعة الأورام والآليات الخلوية لموت الخلايا المبرمج.

تحظى خلايا WEHI-164 بتقدير خاص في الأبحاث نظرًا لاستجابتها لموت الخلايا المبرمج الناجم عن السيتوكينات، مما يجعلها نموذجًا مهمًا لدراسة التفاعل بين السيتوكينات والخلايا السرطانية. هذه الحساسية تجاه السيتوكينات مثل عامل نخر الورم (TNF) وTRAIL (الرابط المحفز لموت الخلايا المبرمج المرتبط بعامل نخر الورم) تضع خط خلايا WEHI-164 كمصدر مفيد لاستكشاف مسارات الإشارات التي تتوسط موت الخلايا وفحص العلاجات المحتملة المضادة للسرطان التي يمكن أن تتلاعب بهذه المسارات. بالإضافة إلى ذلك، تسمح خصائص خط الخلية الشبيهة بالأرومة الليفية بإجراء دراسات حول مورفولوجيا الخلية وخصائص النمو والبيئة الدقيقة للورم، مما يوفر فهمًا أكثر شمولاً لديناميكيات الورم والتفاعلات داخل المصفوفة الخلوية.

على الرغم من استخدامه على نطاق واسع في الأبحاث، يُظهر خط خلايا WEHI-164 العديد من الانحرافات الكروموسومية، وهو أمر شائع بين الخلايا التي تحولت بفعل التسرطن الكيميائي. وتُعد حالات عدم الاستقرار الجيني هذه حاسمة بالنسبة للدراسات التي تركز على فهم كيفية تأثير الاختلافات الجينية على تطور السرطان والاستجابة للعلاجات. يؤكد الاستخدام المستمر لـ WEHI-164 في العديد من الإعدادات البحثية على فائدته في تطوير المعرفة ببيولوجيا السرطان وفي تطوير مناهج علاجية جديدة.

المرض
الساركوما الليفية
المرادفات
  • WEHI 164
  • WEHI164
  • WEHI 164 TC

02التصنيف

كائن حي
الماوس
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
أرومة ليفية شبيهة بالأرومة الليفية
نوع الخلية
الأرومة الليفية
مُسبِّب للأورام
نعم، في فئران Balb/c

04المعرّفات

المرجع
WEHI-164 (كتالوج سايتون رقم 400438)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10090
سيلوصور
CVCL_2251

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
1 × 104 خلية/سم2
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 48 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

السلالة / النوع الفرعي
بالب/ج