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WEHI-164
Malattia
Fibrosarcoma
Sinonimi
WEHI 164, WEHI164, WEHI 164 TC

Documenti

WEHI-164

Cell line · Codice prodotto 400438

The WEHI-164 cell line was originally established from a fibrosarcoma that developed in a BALB/c mouse following subcutaneous injections of 3-methylcholan...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare WEHI-164 è stata originariamente creata da un fibrosarcoma sviluppatosi in un topo BALB/c in seguito a iniezioni sottocutanee di 3-metilcolantrene. Questa linea cellulare deriva dal tessuto mesenchimale e presenta caratteristiche tipiche delle cellule simili ai fibroblasti. WEHI-164 è stato uno strumento fondamentale nello studio del cancro, fornendo approfondimenti in particolare nei campi dell'immunologia tumorale e dei meccanismi cellulari dell'apoptosi.

Le cellule WEHI-164 sono particolarmente apprezzate nella ricerca per la loro reattività all'apoptosi indotta da citochine, che le rende un modello importante per studiare l'interazione tra citochine e cellule tumorali. Questa sensibilità a citochine come il fattore di necrosi tumorale (TNF) e TRAIL (TNF-related apoptosis-inducing ligand) rende la linea cellulare WEHI-164 una risorsa utile per esplorare le vie di segnalazione che mediano la morte cellulare e per lo screening di potenziali terapie antitumorali che potrebbero manipolare queste vie. Inoltre, le proprietà simili ai fibroblasti della linea cellulare consentono di studiare la morfologia delle cellule, le caratteristiche di crescita e il microambiente tumorale, fornendo una comprensione più completa delle dinamiche tumorali e delle interazioni all'interno della matrice cellulare.

Nonostante l'ampio uso nella ricerca, la linea cellulare WEHI-164 presenta diverse aberrazioni cromosomiche, un fenomeno comune tra le cellule trasformate dalla carcinogenesi chimica. Queste instabilità genetiche sono cruciali per gli studi volti a comprendere come le variazioni genetiche possano influenzare la progressione del cancro e la risposta ai trattamenti. L'uso continuo di WEHI-164 in vari contesti di ricerca sottolinea la sua utilità nel progresso della conoscenza della biologia del cancro e nello sviluppo di nuovi approcci terapeutici.

Malattia
Fibrosarcoma
Sinonimi
  • WEHI 164
  • WEHI164
  • WEHI 164 TC

02Classificazione

Organismo
Mouse
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile a un fibroblasto
Tipo di cellula
Fibroblasti
Tumorigenico
Sì, in topi Balb/c

04Identificatori

Riferimento bibliografico
WEHI-164 (numero di catalogo Cytion 400438)
Codice fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_2251

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
1 x 104 cellule/cm2
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 48 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Razza / sottospecie
BALB/c